Anfinsen Redux：单分子水平下的核糖核酸酶折叠研究

《Journal of the American Chemical Society》：Anfinsen Redux: Ribonuclease Folding in the Single-Molecule Regime

单分子酶学监测发现变性RNase A存在快慢两种折叠动力学，揭示慢速脯氨酸异构化为关键路径，证实单分子技术可有效揭示蛋白质折叠中的隐藏异质性。

　　

核糖核酸酶A（RNase A）长期以来被认为在变性后能够自发地重新折叠为其天然构象并恢复催化活性。然而，由于其折叠途径的分子异质性，在传统的批量测量方法中一直难以被清晰地揭示。在这里，我们利用单分子酶学（SME）技术在单分子水平上监测尿素变性后的RNase A的催化活性恢复过程。我们直接观察到，不同的RNase A分子表现出不同的折叠动力学特性，有的折叠速度快，有的慢，这表明它们的重折叠途径存在差异，其中可能涉及到脯氨酸肽键的异构化反应。这些发现证明了单分子酶学技术在揭示蛋白质折叠途径中隐藏的异质性方面的有效性。