在三酰甘油分解代谢过程中，对脂滴组成动态的单细胞荧光分析

《Journal of the American Chemical Society》：Single-Cell Fluorescence Analysis of Lipid Droplet Compositional Dynamics during Triacylglycerol Catabolism

脂滴组成异质性受ATGL调控且参与自噬级联反应。LipiPB Red探针结合荧光寿命成像（FLIM）可区分三酰甘油（TAG）与二酰甘油（DAG），揭示肝细胞癌中脂滴显著异质性，基因敲除ATGL后异质性消失且荧光寿命延长，证实ATGL介导的脂解是脂滴多样性关键调控因素。共定位显示自噬体和溶酶体内脂滴荧光寿命降低，提示自噬过程中存在先脂解后融合的级联降解机制。

　　

脂滴（LDs）是参与脂质代谢和能量稳态的重要细胞器，然而它们在活细胞中的组成异质性仍知之甚少。在这里，我们介绍了一种名为LipiPB Red的红色荧光探针，该探针具有出色的光稳定性、高极性敏感性，并且即使在含有血清的条件下也能在脂滴中长期保持稳定。当用于荧光寿命成像显微镜（FLIM）时，LipiPB Red能够区分单个脂滴中的三酰甘油（TAG）和二酰甘油（DAG）含量。FLIM分析显示，肝癌细胞中的脂滴存在显著的组成异质性。通过基因敲低或药物抑制脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL），这种异质性被消除，同时平均荧光寿命也有所延长，这表明ATGL介导的脂解是调节脂滴多样性的关键因素。此外，与自噬标记物进行共成像后发现，位于自噬体或自噬溶酶体内的脂滴的荧光寿命缩短。这些发现表明，在脂质吞噬过程中存在一个连续的脂质降解级联反应，其中脂质水解发生在溶酶体融合之前。