打破灵敏度与便捷性之间的权衡:一种基于骆驼科动物HCAb的免疫测定方法,用于检测食品中的多重抗生素增效剂,同时实现最小化的预处理步骤

《Journal of Agricultural and Food Chemistry》:Breaking the Sensitivity-Convenience Trade-off: A Camelid HCAb-Based Immunoassay for Multi-Residue Detection of Antibacterial Synergists in Foods with Minimized Pretreatment

【字体: 时间:2025年10月23日 来源:Journal of Agricultural and Food Chemistry 6.2

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  重链抗体用于开发高稳定性抗生素协同剂检测方法,通过简化样本处理步骤实现快速筛查,检测限低至0.14 μg/L。

  
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传统抗体(ConAbs)在食品基质或目标提取试剂中的不稳定性常常限制了免疫测定的便利性和灵敏度。在这项研究中,羊驼被注射了水溶性佐剂以产生针对抗菌协同剂(ASGs)的重链抗体(HCAbs)。与ConAb C5相比,HCAb H5在恶劣条件下(63°C、pH 3.0–11.0、6.0 mol L–1 NaCl、30%甲醇、30%乙腈)表现出更强的稳定性(结合活性>80%,IC50变化<2倍)。基于H5的间接竞争性ELISA(icELISA)对三甲氧嘧啶(TMP)、二甲氧嘧啶(DVD)、奥美托嘧啶(OMP)和巴基洛嘧啶(BQP)的IC50值分别为1.24、1.44、1.60和2.11 μg L–1,交叉反应率分别为100%、86.3%、77.7%和56%。样品制备过程被简化为最少的稀释步骤——鸡肉、鸡蛋、猪肉和牛奶样品分别只需稀释2倍、4倍、4倍和8倍——整个预处理过程可在1–8分钟内完成。检测限(LODs)范围为0.14至1.36 μg L–1/μg kg–1,回收率为76.4–107.3%,变异系数(CV)低于14.1%。这是首个基于HCAbs的针对ASGs的icELISA方法,具有高灵敏度、稳健性,并且对复杂食品基质的预处理要求极低。

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