健康犬与库欣综合征犬院内及居家唾液采样的可行性研究：一种无应激皮质醇监测新方法

《BMC Veterinary Research》：Feasibility and usefulness of in-hospital and at-home salivary sampling in healthy dogs and trilostane-treated dogs with Cushing’s syndrome: a prospective observational study

本研究针对犬库欣综合征(CS)治疗监测中院内采血应激影响皮质醇测量准确性的问题，开展了唾液采样可行性及诊断效能的临床研究。通过LC-HRMS技术对比健康犬与曲洛斯坦治疗犬的院内/居家唾液皮质醇浓度，发现CS犬唾液采样成功率仅47%，但居家样本能有效规避应激干扰。结果为开发无创治疗监测方案提供了重要循证依据。

　　

当一只狗狗被诊断出库欣综合征（又称肾上腺皮质功能亢进），宠物主人和兽医往往要面对长期治疗监测的难题。目前主要依靠临床症状观察、生化指标和激素检测（如服药前血清皮质醇或ACTH刺激试验）来评估治疗效果，但这些方法存在明显局限：频繁的医院复查不仅耗时费力，许多狗狗在就诊时产生的恐惧反应会导致皮质醇水平升高，可能误导治疗调整。更棘手的是，仅依赖主人对症状的主观描述往往不够准确。有没有一种方法能像人类医学中测量夜唾皮质醇那样，让主人在家中轻松完成采样，避免医院应激对结果的影响呢？

这正是苏黎世大学研究人员在《BMC Veterinary Research》发表的最新研究试图解决的问题。团队将人类内分泌疾病监测的成功经验迁移到兽医领域，首次系统评估了采用姜粉处理采样拭子结合液相色谱-高分辨质谱(LC-HRMS)技术，在健康犬和曲洛斯坦治疗犬中进行院内及居家唾液采样的可行性和诊断价值。

研究采用前瞻性观察设计，纳入10只健康对照犬和38只确诊为垂体依赖性肾上腺皮质功能亢进(PDH)并接受曲洛斯坦治疗的犬只。采样方法经过精心优化：使用浸渍姜粉的Salimetrics?棉拭子在犬只口腔内放置30秒，通过姜的味觉刺激促进唾液分泌。健康犬在医院和家中分别采样，而CS犬则在医院服药前血清采样时同步采集唾液，并由主人在家中三个时间点（早8点、下午4点、晚8点）完成采样。

关键技术方法包括：1）临床队列构建（健康对照与患者分组）；2）标准化唾液采样流程（姜粉刺激30秒采样法）；3）LC-HRMS皮质醇检测技术（高灵敏度生物分子定量）；4）平行血清检测验证（化学发光免疫分析法与LC-HRMS对比）；5）临床症状评分系统（9项指标45分阈值评估治疗控制情况）。

可行性研究结果揭示了一个关键挑战：虽然健康犬的唾液采样成功率达到100%，但CS犬的院内采样成功率仅为47%（38只中18只成功），居家采样成功率进一步降至39%（18只中仅7只成功）。采样失败的主要原因是犬只的防御行为（摇头、试图咬人、爪扒拭子）或过度咀嚼损坏拭子。值得注意的是，CS犬的体重显著轻于健康犬（中位数8.2kg vs 20.9kg），小型犬口腔操作难度可能是影响因素之一。

激素浓度分析显示，在医院环境中，健康犬与CS犬的血清和唾液皮质醇浓度均无显著差异（图1A、B），这可能反映了大多数CS犬的良好治疗控制状态。而居家采样数据则呈现更有意义的模式：健康犬在不同时间点的唾液皮质醇无显著日间波动（图2），这与人类皮质醇的昼夜节律形成鲜明对比。

地点对比研究发现，健康犬在医院和家中的唾液皮质醇浓度无显著差异（图4A），可能得益于它们对医院环境的熟悉。然而在CS犬中，医院测量的唾液皮质醇显著高于居家水平（图4B），清晰证明了医院应激对激素测量的干扰效应。

治疗监测效能评估通过对7只CS犬的深入分析展现了居家监测的潜在价值（图5）。临床控制良好的6只犬中，有4只的院内服药前血清皮质醇高于目标范围（28-140 nmol/L），但它们的居家唾液皮质醇有3只低于检测限，1只低于未控制犬。唯一未控制犬的居家唾液皮质醇浓度最高，提示居家测量可能更真实反映基础皮质醇状态。这一发现尤其重要，因为医院应激可能导致皮质醇升高，造成"控制不佳"的假象。

研究结论指出，虽然当前唾液采样技术在CS犬中的应用仍面临挑战，但居家测量能够有效规避医院应激对皮质醇水平的干扰。LC-HRMS技术的高灵敏度为微量样本检测提供了可能，但需要进一步优化采样方法（如改用海绵材质拭子、加强主人培训）。特别值得注意的是，研究中多数控制良好犬的居家唾液皮质醇低于检测限，而这一现象并未伴随肾上腺功能减退的临床表现，提示单纯依赖居家皮质醇监测可能难以识别药物过量情况。

这项研究的真正价值在于指明了未来发展方向：通过改进采样技术，居家唾液皮质醇监测有望成为犬库欣综合征治疗管理的革命性工具。它不仅能够提高测量准确性，还能大幅提升犬只福利和主人依从性，为慢性内分泌疾病的长期管理开辟了新途径。随着采样技术的不断优化和靶向参考范围的建立，这种无创监测方法或将成为兽医内分泌学领域的重要突破。