CD42富集胞外囊泡在烧伤合并脓毒症患者中促进血小板聚集及器官损伤的作用机制研究

《International Journal of Nanomedicine》：CD42-Enriched Extracellular Vesicles Contribute to Increased Platelet Aggregation and Possibly Organ Damage in Patients with Burn Injury Complicated by Sepsis

本研究发现烧伤合并脓毒症（BSP）患者血浆中CD42a阳性的胞外囊泡（EVs）显著升高，且与序贯器官衰竭评分（SOFA）呈正相关。通过多重表型分析和血小板聚集实验，证实CD42a-EVs可作为脓毒症诊断标志物（AUC=0.947），并通过CD42-GP Ib-IX复合物途径增强肾上腺素（EPI）和二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集。该研究为烧伤脓毒症的血栓炎症机制提供了新的诊疗靶点。

　　

背景

严重烧伤是危及生命的损伤类型，其死亡风险与脓毒症并发症密切相关。脓毒症作为烧伤患者24小时后的主要死因，占非幸存者死亡原因的50-60%。由于烧伤后皮肤屏障破坏易导致细菌入侵，脓毒症的早期诊断面临挑战。近年研究发现，胞外囊泡（EVs）作为脂质双层包裹的细胞衍生颗粒，通过携带蛋白质、微RNA等活性物质参与细胞间通讯，在脓毒症病理过程中发挥重要作用。本研究聚焦烧伤合并脓毒症患者血浆EVs的表型特征及其在血小板活化中的功能机制。

方法

研究纳入33例烧伤患者（23例脓毒症BSP，10例非脓毒症BnSP）和10例健康对照（HS）。通过超速离心法和沉淀法分离血浆EVs，采用纳米颗粒追踪分析（NTA）、透射电镜（TEM）和流式细胞术进行表征。利用微球多重流式细胞术分析39种EV表面抗原，并通过光透射聚集法检测EVs对富血小板血浆（PRP）聚集功能的影响。采用抗CD42b中和抗体（克隆6B4）阻断实验验证CD42通路的作用。

结果

EVs表征显示，脓毒症患者来源的EVs直径主要分布于100-200nm，表达CD9、CD63等典型标志物。多重表型分析发现BSP组EVs的CD42a（GPIX）表达显著高于BnSP（p<0.05）和HS（p<0.0001），且CD42a水平与SOFA评分严重程度正相关（SOFA≥11组 vs 4-6组，p=0.008）。ROC曲线分析显示CD42a-EVs区分BSP与BnSP的AUC达0.947（95%CI:0.855-1.000）。功能实验表明，BSP来源的EVs虽不直接诱导血小板聚集，但能显著增强EPI和ADP的促聚集作用（p<0.01），该效应可被抗CD42抗体抑制（p<0.05）。值得注意的是，EVs的促聚集功能与其浓度无直接关联，而取决于CD42a的表达水平。

讨论

本研究首次系统描绘了烧伤脓毒症患者EVs的表型图谱，揭示CD42a-EVs作为诊断标志物和病理介质的双重价值。CD42a与CD42b构成的GPIb-IX复合物可能通过von Willebrand因子（vWF）途径促进血小板-单细胞相互作用，加剧血栓炎症反应。与其他研究相比，本研究创新性地采用多重表型分析技术，避免了单一标志物的局限性。排除弥散性血管内凝血（DIC）和血小板减少症患者的设计，有效控制了EVs分析的异质性。尽管存在样本量有限、脓毒症诊断标准适配性等挑战，研究结果仍为烧伤脓毒症的精准诊疗提供了新视角。

结论

CD42a富集EVs可作为烧伤脓毒症的潜在生物标志物，并通过增强血小板聚集参与器官损伤进程。该发现不仅深化了对脓毒症血栓炎症机制的理解，也为开发靶向EVs的干预策略提供了实验依据。未来需通过多中心研究验证CD42a-EVs在更广泛脓毒症人群中的普适性。