RfxCas13d-crRNA-脱靶RNA复合物的冷冻电镜结构揭示其RNA编辑机制与构象变化

《Structure》：Cryo-EM structure of the RfxCas13d-crRNA-off-target-RNA complex

本研究通过冷冻电镜解析了RfxCas13d与crRNA及脱靶RNA形成的三元复合物结构，揭示了Cas13d在结合RNA时的构象变化及Mg2+对crRNA结构的稳定作用，为优化Cas13d的RNA编辑工具提供了结构基础。

　　

杨（Yang）等人通过冷冻电镜（cryo-EM）解析了RfxCas13d（一种来源于Ruminococcus flavefaciens的VI-D型CRISPR-Cas效应蛋白）与crRNA（引导RNA）及脱靶单链RNA组成的三元复合物结构，以及RfxCas13d与crRNA的二元复合物结构，分辨率分别达到3.10 ?和3.13 ?。研究发现，当结合脱靶RNA时，RfxCas13d会发生构象变化，但其催化活性位点保持稳定。镁离子（Mg²⁺）在稳定crRNA重复区域结构中发挥关键作用，可能影响RNA结合能力。该研究为理解Cas13d的RNA靶向机制提供了结构依据，并推动了其在转录组工程中的应用发展。