综述：基于相似性的含水杨醛骨架蛋白谱分析：其对利什曼原虫无鞭毛体具有活性

《ACS Omega》：Similarity-Based Profiling of Hydrazone-Containing Scaffolds Active Against Leishmania Amastigotes

本文系统综述了水合物基化合物作为抗利什曼病剂的潜力，采用三维电形状分析和分子对接技术，探讨其活性与机制，并提出了协同疗法的未来方向。

　　本研究探讨了含有腙结构的化合物作为抗利什曼病药物的潜力，特别关注其对细胞内利什曼原虫（*Leishmania* amastigotes）的活性。通过一种以化合物三维电形状特性为中心的策略，结构分析突破了传统基于功能基团的分析方法，利用分子对齐技术来识别与抗利什曼活性相关的关键结构特征。研究系统整理了以往的相关文献，强调了那些在体外实验中表现出良好活性的化合物。通过分子叠加技术进行结构比较，有助于识别具有潜力的化合物并探索其可能的作用机制。结合计算与实验方法，为腙结构的合理优化提供了有价值的见解，目标是提高药物的有效性、生物利用度和安全性。然而，完全阐明这些化合物的精确分子靶点和作用机制仍然是未来研究的重要挑战。

利什曼病是由利什曼原虫（*Leishmania*）引起的一种寄生虫疾病，通过雌性沙蝇传播。它表现出四种主要的临床形式：皮肤利什曼病（CL）、黏膜皮肤利什曼病（MCL）、内脏利什曼病（VL 或黑热病）以及黑热病后皮肤利什曼病（PKDL）。在哺乳动物宿主中，利什曼原虫在吞噬细胞内增殖，特别是巨噬细胞中。沙蝇在进食时会摄入这些原虫，它们随后在昆虫的肠道中转变为运动性前鞭毛虫，完成感染循环。世界卫生组织（WHO）指出，在利什曼病流行地区，超过十亿人面临感染风险，每年约有30,000例新的内脏利什曼病病例和超过一百万例新的皮肤利什曼病病例。疾病负担最重的地区包括印度、孟加拉国、尼泊尔、东非和巴西。同时，HIV合并感染进一步复杂化了治疗，增加了寄生虫负荷，恶化了预后，并提高了复发率。

现有的内脏利什曼病治疗方法在有效性和毒性方面存在差异。目前只有米替福辛（miltefosine）可以口服，而其他药物如脂质体两性霉素B（liposomal amphotericin B）和帕罗霉素（paromomycin）则需要静脉或肌肉注射，这在许多流行地区造成了后勤上的挑战。因此，迫切需要一种简单、经济、安全且有效的口服疗法。近年来，新的药物组合，包括脂质体两性霉素B、帕罗霉素和米替福辛，已被引入，提供了更好的安全性和耐受性。然而，这些疗法仍然昂贵，难以使用，且在流行地区常见的高温环境下稳定性差。此外，疗效在不同地区存在差异：虽然在南亚的治疗需求在一定程度上得到满足，但在东非和拉丁美洲，药物疗效和耐受性仍存在问题。

理想的内脏利什曼病治疗方案应包括一个短期的口服疗法，保持疗效，提高耐受性，并防止耐药性产生。研究重点集中在开发具有不同作用机制的联合疗法，以应对耐药性的出现。药物研究倡议（DNDi）提出了目标产品特征（TPPs），强调了在10天治疗窗口内具有高疗效、对耐药株有效，并适合在不同地区使用的疗法的重要性。

本研究的核心关注点是基于腙的化合物，这类分子因其易于合成和广泛的生物活性而受到关注。这些化合物包括氨基胍腙、硫代氨基脲、*N*-酰基腙和氨基脲，通常通过简单的缩合反应合成。尽管在药物化学领域受到欢迎，但仅有少数结构进入临床应用。由于其结构的灵活性，它们成为优化抗利什曼药物发现的优秀候选者。

本研究采用了不同于传统的方法，即不单纯关注分子的功能基团，而是优先考虑化合物的三维电形状相似性。通过分子对齐技术，包括基于形状的叠加，研究比较了在文献中测试过的结构相似的腙类化合物。这种方法旨在揭示其可能的作用机制，并识别具有相似特性的候选化合物。此外，研究还探索了未直接针对利什曼原虫但具有相关结构的化合物，以生成可能强化关于潜在分子靶点的假设。

这种结合形状对齐和电形状分析的比较研究方法为文献回顾提供了一个新的视角。通过不仅关注分子相似性，还关注局部和全局形状对齐，研究旨在为研究人员提供新的实验测试假设。这些假设可以通过体外实验或计算机模拟来研究药物-靶点相互作用并优化化合物设计。通过这些分析获得的见解可能支持开发具有更高疗效、更好生物利用度和更强抗利什曼潜力的化合物。

研究采用了一种系统的方法来整理文献中的化合物。首先，使用“利什曼”、“原虫”以及“合成”或“天然”作为关键词，在Scopus数据库中搜索相关研究，从最早的索引论文（1958年）开始。选择了在模拟人类阶段的模型中表现最活跃的化合物，包括无菌原虫、吞噬细胞内原虫和体内实验。当化合物不是直接的类似物时，每个研究中包括多个代表化合物。化合物的结构基于其名称或直接使用Marvin Sketch绘制，并通过Mopac软件的PM7半经验方法进行三维结构优化。

对每个系列中的所有化合物进行了结构比较，使用LS-align生成分子叠加。为Gephi软件创建了正确的输入，其中节点代表所研究的化合物，边表示LS-align相似性得分。低相似性边被过滤，以移除与分析无关的节点。为了识别本文中讨论的化合物的直接类似物，使用了PubChem字典中的二进制指纹，通过Tanimoto方程计算相似性。这些工具允许将选定的化合物与数据库中的记录进行关联，从而识别可能的生物靶点。此外，这种方法提供了每个化合物的通用名称和相关文献，有助于验证其身份并支持关于其生物活性的假设。

为了确保研究的连贯性，当其他化合物是相近的类似物时，仅选择每个研究中的一个代表化合物；当结构差异更为明显时，则考虑多个化合物。优先选择在原虫上表现出最强活性的化合物，无论是否为无菌原虫、吞噬细胞内原虫或理想情况下的体内实验，以确保对最有效分子的聚焦和有意义分析。这些化合物的SDF文件可在补充信息中找到。

研究中的化合物（1）*Raphin 1* 和（2）AKOS017522419 都被设计和评估用于对抗利什曼 *chagasi* 的活性。*Raphin 1* 是一种已知的蛋白磷酸酶调节亚基 PPP1R15B（R15B）的抑制剂，具有 33 nM 的解离常数（Kd）。它以前在亨廷顿氏病的小鼠模型中显示出疗效。然而，利什曼原虫缺乏与 PPP1R15B 的直接对应物，使得难以建立 *Raphin 1* 在利什曼原虫中的作用机制与其在其他生物中的已知靶点之间的直接关联。另一个表现出抗寄生虫活性的腙类化合物是（3）*RJ1*，其对 *Plasmodium falciparum* 的二氢叶酸还原酶（DHFR）的活性似乎很有希望，即使在四重突变体中也能抑制该酶。鉴于其与 *RJ1* 的结构相似性，进行了对接研究以调查 *Raphin 1* 在活性位点的结合行为。

AKOS017522419 是一种商业可得的化合物，与（4）*96826*-*57*-*2* 具有结构相似性，后者已知具有抗增殖特性。这些化合物与（5）*guanabenz* 具有连接，后者具有通过抑制 eIF2α 磷酸化而表现出的显著抗寄生虫活性。*guanabenz* 是一种 α-2 肾上腺素受体激动剂，也显示出对 *P. falciparum* 和 *Toxoplasma gondii* 的活性，通过抑制 eIF2α 磷酸化。这些化合物可能通过抑制利什曼原虫的 PERK，防止 eIF2a 磷酸化。然而，需要进一步研究以验证这一机制。

一种独特的（6）*carbamoyl-N-aryl-imine-urea* 框架被评估用于对抗利什曼 *amazonensis* 和 *braziliensis* 的原虫活性。此外，还使用小鼠模型评估了该化合物的体内疗效。体外实验显示了显著的利什曼杀灭活性，尤其是对 *L. amazonensis* 原虫。在小鼠模型中，化合物 6 显示出良好的效果，通过减少寄生虫负荷和病变大小，表明其干扰了寄生虫的某些关键生物学过程。然而，没有找到类似的化合物，也没有报告特定的作用机制，需要进一步研究以确定其分子靶点和对寄生虫生物学的干扰方式。

化合物（7）AKOS002959447 由同一研究团队开发，已被发现对 *Mycobacterium tuberculosis* 在高通量实验中表现出活性。其密切相关的化合物（8）*Benzalthiosemicarbazone* 对 *P. falciparum* 的二氢叶酸还原酶表现出活性，这表明 AKOS002959447 可能共享相同的靶点。

化合物（9）*thiosemicarbazone* 被测试用于对抗利什曼 *donovani*，重点在于其与标准抗利什曼药物米替福辛和两性霉素B的协同效应。研究显示，化合物 9 与这些药物表现出显著的协同作用，特别是对原虫形式。一个关键发现是其能够破坏线粒体膜电位，导致寄生虫细胞死亡，这种机制在联合使用时被进一步放大。该化合物的设计结合了氯喹啉和硫代氨基脲结构，与化合物（10）*CHEMBL5286667* 相似，后者对 *M. tuberculosis* 具有活性。化合物 10 对 *M. tuberculosis* H37Rv菌株表现出低微摩尔的活性，并抑制了DNA旋转酶。这一机制也可能适用于化合物 9 在利什曼原虫中的作用，因为拓扑异构酶功能障碍与线粒体活动调节有关。

在另一项研究中，32种合成化合物中，化合物（11）表现出EC50值低于10 μM，对利什曼 *donovani* 原虫具有选择性指数（SI）大于250的活性。化合物 11 与高度有毒的化合物（12）*CHEMBL1939440* 相似，后者显示出急性口服毒性和对水生生物的显著毒性。与（13）*2-formylquinoline thiosemicarbazone* 的相似性也很显著，因为该分子已被发现会破坏DNA生化过程，特别是通过抑制Topoisomerase IIα催化活性。这些发现表明，化合物 9 和 11 可能也作用于维持有丝分裂染色体结构的必需靶点，且化合物 11 可能表现出类似的毒性。

在另一项研究中，化合物（14）表现出显著的抗真菌和抗寄生虫活性，特别是对利什曼 *amazonensis*。化合物 14 对前鞭毛虫的活性强于对细胞内原虫的活性，这可能是由于其必须克服的生物屏障才能到达细胞内寄生虫。一个相关类似物（15）*CHEMBL2007612* 已显示出对线粒体基础切除修复（mitochondrial base excision repair）的活性，该过程对于修复线粒体DNA的氧化损伤至关重要。由于人类和利什曼原虫的 TDP1 之间有合理的序列相似性，这种酶可能成为抗利什曼治疗策略的有希望靶点。

另一项研究中，化合物（16）*thiosemicarbazone* 被测试用于对抗利什曼 *panamensis* 原虫，其结构与（17）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现能抑制利什曼原虫的细胞内蛋白酶。这些化合物可能通过抑制细胞内蛋白酶发挥作用，特别是在 *L. infantum* 中的 *cruzain*。这些发现表明，化合物 16 可能也作用于利什曼原虫的细胞内蛋白酶。

一些结构相似的腙衍生物被研究用于增强硫代咔唑的抗利什曼活性。研究评估了（18）*thiosemicarbazone* 对利什曼 *amazonensis* 的体外活性，重点关注具有低细胞毒性的强效化合物。该研究建议，细胞内蛋白酶如 cathepsin L 可能是其作用机制的一部分。类似硫代氨基脲衍生物（19）被测试用于对抗 *Trypanosoma cruzi* 的 *cruzain*，这与细胞内蛋白酶抑制假说相一致。

一系列相关的吡唑基和吡啶基腙衍生物被研究用于对抗利什曼 *amazonensis* 和 *braziliensis* 原虫。这些化合物与（17）*1-[(phenylmethylidene)amino]guanidine* 结构相似，其中胍基被替换为 2-吡啶基腙基团，保持了相似的药效团特性。化合物 18 被发现诱导活性氧（ROS）积累和线粒体膜去极化，导致寄生虫能量生产受损和类似凋亡的细胞死亡，而不对巨噬细胞产生毒性。一个密切相关的化合物（20）*CHEBI:120813* 被发现能抑制利什曼原虫的甲硫氨酸亚砜还原酶 A（MsrA），该酶对于保护寄生虫免受氧化应激和促进其在巨噬细胞中的生长至关重要。这些发现支持了作者的假设，即ROS和线粒体功能障碍在化合物的作用机制中起关键作用。

一些结构相似的腙衍生物被研究用于增强硫代咔唑的抗利什曼活性。研究评估了（21）*thiosemicarbazone* 对利什曼 *donovani* 的体外活性，重点在于寻找具有低细胞毒性的强效化合物。该研究建议，细胞内蛋白酶如 cathepsin L 可能是其作用机制的一部分。类似硫代氨基脲衍生物（22）被测试用于对抗 *Trypanosoma cruzi* 的 *cruzain*，这与细胞内蛋白酶抑制假说相一致。

另一项研究中，化合物（23）被发现能有效诱导线粒体功能障碍，导致线粒体膜电位去极化和寄生虫细胞死亡。研究还提出，化合物（24）可能通过影响DNA生化过程，特别是通过抑制Topoisomerase IIα催化活性。这些发现表明，化合物 23 和 24 可能作用于维持有丝分裂染色体结构的必需靶点。

在另一项研究中，化合物（25）被发现能显著增加ROS的产生，导致寄生虫细胞收缩、磷脂酰丝氨酸暴露和DNA断裂，这些都是寄生虫类似凋亡的典型特征。研究还提出，化合物（26）可能通过干扰寄生虫的铁利用，抑制其生长。铁在宿主-病原体相互作用中起关键作用，因为细胞内寄生虫如利什曼原虫依赖宿主的铁进行生存、增殖和致病。利什曼原虫通过切割铁载体如多聚(rC)-结合蛋白，破坏铁在铁蛋白中的储存，从而促进其在巨噬细胞内的生长。可以假设，化合物 26 可能干扰这些过程，抑制寄生虫对宿主铁的利用。然而，需要进一步研究以确认这一假设。

化合物（27）*carbamoyl-N-aryl-imine-urea* 被测试用于对抗利什曼 *amazonensis*，其结构与（28）*methyl-N,N’-dinicotinoylcarbamimidoselenoate* 相似，后者被发现能显著抑制细胞内蛋白酶如 *cruzain*。这些发现表明，硫代氨基脲衍生物可能成为这些酶的抑制剂。

在另一项研究中，化合物（29）被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。化合物 29 的结构与（30）*2-pyrimidinyl hydrazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 30 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（31）*oxadiazole* 被发现对 *Leishmania mexicana* 的磷酸激酶具有活性。该化合物的结构与（32）*furoxanyl N-acylhydrazone* 相似，后者在对抗利什曼 *amazonensis* 的实验中表现出更高的选择性和更强的活性。这些发现支持了化合物 32 在抗利什曼方面的潜力。

化合物（33）被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（34）*carboxyimidamide* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 34 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（35）*2-pyrimidinyl hydrazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（36）*carboxyimidamide* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 36 可能表现出类似的特性。

化合物（37）*2-pyrimidinyl hydrazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（38）*carboxyimidamide* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 38 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（39）*2-pyrimidinyl hydrazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（40）*carboxyimidamide* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 40 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（41）*nitrofurazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（42）*nitrofurazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 42 可能表现出类似的特性。

化合物（43）*furazolidone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（44）*furazolidone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 44 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（45）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（46）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 46 可能表现出类似的特性。

化合物（47）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（48）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 48 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（49）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（50）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 50 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（51）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（52）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 52 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（53）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（54）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 54 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（55）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（56）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 56 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（57）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（58）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 58 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（59）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（60）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 60 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（61）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（62）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 62 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（63）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（64）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 64 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（65）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（66）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 66 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（67）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（68）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 68 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（69）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（70）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 70 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（71）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（72）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 72 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（73）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（74）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 74 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（75）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（76）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 76 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（77）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（78）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 78 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（79）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（80）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 80 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（81）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（82）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 82 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（83）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（84）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 84 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（85）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（86）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 86 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（87）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（88）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 88 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（89）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（90）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 90 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（91）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（92）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 92 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（93）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（94）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 94 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（95）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（96）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 96 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（97）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（98）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 98 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（99）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（100）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 100 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（101）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（102）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 102 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（103）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（104）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 104 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（105）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（106）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 106 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（107）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（108）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 108 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（109）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（110）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 110 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（111）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（112）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 112 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（113）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania* 的寄生虫负荷，并在感染小鼠的脾脏中达到73%的减少。该化合物的结构与（114）*thiosemicarbazone* 相似，后者被发现对 *Leishmania* 的线粒体功能和ROS产生具有重要作用。这些发现表明，化合物 114 可能表现出类似的特性。

研究中的化合物（115）*thiosemicarbazone* 被发现能显著减少 *Leishmania*