MnO2@Mn3O4异质结作为共反应物催化剂，与T形DNA循环–CRISPR/Cas12a级联放大技术结合，用于实现位点特异性的N6-甲基腺苷RNA修饰检测

《Analytical Chemistry》：MnO2@Mn3O4 Heterojunction as a Coreactant Catalyst Collaborated with T-Shaped DNA Cycling–CRISPR/Cas12a Cascade Amplification for Locus-Specific N6-Methyladenosine RNA Modification Detection

m?A检测电化学发光传感器开发及临床应用研究，采用MnO?@Mn?O?异质结催化剂与T型DNA循环-CRISPR/Cas12a三重信号放大策略，实现0.05 pM检测限，成功应用于HeLa细胞总RNA中定位特异性m?A检测。

　　

作为主要的RNA修饰类型，N6-甲基腺苷（m⁶A）在细胞基本功能和致癌过程中发挥着关键的调控作用。然而，对位点特异性的m⁶A修饰进行精确分析仍面临诸多挑战。在这项研究中，研究人员开发了一种独特的电化学发光（ECL）生物传感器，用于特异性检测RNA中的m⁶A。该传感器首次采用了MnO₂@Mn₃O₄异质结作为核心反应催化剂，并结合了T形DNA循环放大和CRISPR/Cas12a级联放大技术。实验发现，MnO₂@Mn₃O₄异质结显著增强了反应物的催化活性，使得AuNPs/MnO₂@Mn₃O₄/(2,2′-联吡啶)二氯钌(II)（Ru(bpy)₃²⁺)/Nafion/GCE体系的ECL强度比AuNPs/Ru(bpy)₃²⁺/Nafion/GCE体系提高了7.3倍。随后，T形DNA循环放大技术将目标m⁶A RNA有效转化为可放大的生物信号，这一过程还通过基于框架核酸（FNA）的光控核酸保护机制得到了CRISPR/Cas12a信号放大系统的进一步增强，从而确保了检测的灵敏度和特异性。通过这种三重信号放大策略，该生物传感器的检测限可低至0.05 pM（信噪比S/N = 3），检测范围覆盖100 fM至100 nM。该ECL生物传感器已成功应用于从HeLa细胞中提取的总RNA样本中检测位点特异性的m⁶A修饰，显示出其在临床诊断中的巨大潜力。