诱饵SELEX技术：通过药物定向选择针对PSMA的适配体，实现对小鼠体内前列腺癌异种移植瘤的靶向治疗

《Journal of the American Chemical Society》：Baited SELEX: Drug-Directed Selection of Aptamers to PSMA for In Vivo Targeting of Prostate Cancer Xenografts in Mice

本研究采用连接小分子配体与简并DNA库的SELEX策略，筛选出特异性结合前列腺癌PSMA的高亲和力aptamers。通过荧光标记Pluvicto和引入修饰核苷酸，同时增强aptamer的血清稳定性和结合能力。实验显示所获aptamer可有效区分肿瘤与正常唾液腺PSMA表达。

　　

我们提出了一种策略，将药物-药效团与简并DNA文库结合，用于通过指数富集（SELEX）技术进行细胞和全动物水平的配体系统进化，从而定向选择针对特定目标的适配体。这种方法能够在小分子的引导下发现兼具高亲和力和高组织特异性的适配体。我们将这一方法应用于前列腺癌（PCa）的关键研究领域：将FDA批准的药物Pluvicto的荧光类似物与简并N40-DNA文库结合，以筛选针对前列腺特异性膜抗原（PSMA）的适配体。为了获得类似抗体的功能，我们引入了两种修饰的dNTP——酚基-dT和萘基-dC——以增强所选适配体的亲和力和血清稳定性。经过31轮细胞SELEX筛选后，在携带LNCaP异种移植瘤的小鼠体内进行了一轮进一步筛选，下一代测序技术帮助我们选出了多个适配体，其中一种适配体对PSMA的亲和力非常高（Kd约0.8 nM）。其亲和力既依赖于小分子药物，也依赖于这些修饰的核苷。鉴于识别能够在肿瘤和唾液腺中区分PSMA的分子的艰巨挑战，我们成功筛选出了能够选择性结合PSMA表达肿瘤而不影响唾液腺的适配体。使用针对PSMA的药效团作为分子诱饵，这是首次实现针对肿瘤上特异性靶点进行SELEX筛选的同时避免与正常组织中相同靶点结合的案例。最终获得的适配体属于混合生物制剂，它们提升了小分子药物-药效团的亲和力和肿瘤特异性。