优化电融合技术高效制备针对氯吡硫磷的单克隆抗体及其在侧向流动免疫测定中的应用

《Journal of Agricultural and Food Chemistry》：Optimized Electrofusion for Efficient Generation of Monoclonal Antibodies against Chlorpyrifos and Its Application in Lateral Flow Immunoassay

氯吡虫啉检测新方法：优化电融合技术合成配体并生成17种高亲和力单克隆抗体，开发基于金纳米颗粒的快速检测法（检测限0.005-0.02 mg/kg），通过UPLC-MS/MS验证准确性，适用于多国残留标准监测。

　　

免疫测定是检测农药残留的可靠方法，其中抗体的质量决定了测定的准确性。在这项研究中，我们合成了四种半抗原，并利用优化的电融合技术生成了17种针对氯吡硫磷（CHP）的单克隆抗体（mAbs）。通过负选择B淋巴细胞并使用最佳诱导剂（10 μg/mL白细胞介素-4和2.5 ng/mL脂多糖）处理，电融合率提高到了0.206%，这是传统电融合方法的10倍。利用mAb 7A2F8E5开发的基于金纳米粒子（AuNP）的侧向流动免疫测定法（AuNP-LFIA）在缓冲液中能够检测到1.25 ng/mL的氯吡硫磷浓度，在各种作物中可检测到0.005至0.02 mg/kg的浓度，这些浓度均低于美国、日本和中国的最大残留限量。AuNP-LFIA的准确性通过UPLC-MS/MS进一步得到了验证。这些发现展示了一种新型且高效的电融合策略，用于生成高亲和力的单克隆抗体，并建立了一种快速、灵敏、可靠的AuNP-LFIA方法，可用于实际监测农产品中的氯吡硫磷残留。