化学蛋白质组学研究揭示FAM114A2是Wikstroelide E发挥逆转HIV-1潜伏作用的功能靶点

《Journal of Proteome Research》：Chemoproteomics Reveals FAM114A2 as a Functional Target of Wikstroelide E for Reversal of HIV-1 Latency

该研究通过化学蛋白质组学和小规模蛋白质组学分析，发现二萜类化合物Wikstroelide E能以2.14±0.11 nM的EC50激活潜伏HIV-1，其机制涉及PKC β-NF-κB信号通路。通过合成光敏探针并验证，确定FAM114A2为该化合物逆转HIV潜伏性的关键靶点，该靶点同时参与其他PKC激动剂的作用。研究揭示了二萜类化合物作为新型潜伏逆转疗法的潜力。

　　

HIV-1的潜伏库是一种隐藏的“堡垒”，能够帮助病毒逃避免疫系统的攻击并阻碍抗逆转录病毒治疗的效果。消除这些潜伏病毒库是实现HIV根除策略的关键环节之一。许多天然二萜类化合物具有很高的激活潜伏HIV的能力，但它们的作用靶点目前仍大多未知。在本研究中，我们发现一种名为Wikstroelide E的二萜化合物，在2D10细胞和J-Lat A2细胞中，其激活潜伏HIV的EC₅₀值分别为2.14 ± 0.11 nM和2.06 ± 0.20 nM（通过流式细胞术测定）。大规模定量蛋白质组学分析及生物学验证进一步证实，Wikstroelide E能够通过PKC β-NF-κB信号通路发挥这种作用。此外，我们还通过将Wikstroelide E的C₂₀-OH位点修饰为二唑炔基团，合成了一种光敏探针#2-PP，以便与细胞内的目标蛋白发生共价结合。利用定量化学蛋白质组学方法，我们共鉴定出15个潜在的Wikstroelide E作用靶点。其中，FAM114A2通过RNAi实验、pull-down检测及细胞共定位分析被确认为Wikstroelide E激活潜伏HIV的功能靶点。敲低FAM114A2会抑制PKC激动剂型潜伏病毒逆转剂（LRAs）的效应，但对非PKC激动剂型LRAs则无影响。这表明FAM114A2不仅是Wikstroelide E激活潜伏HIV的功能靶点，还参与其他由PKC激动剂驱动的HIV潜伏逆转过程。我们的研究结果为理解Wikstroelide E逆转HIV潜伏的分子机制提供了重要线索，同时也凸显了二萜类化合物在开发治疗性潜伏病毒逆转剂方面的巨大潜力。