血管紧张素III在bEnd.3脑内皮细胞中可体外诱导血脑屏障完整性的破坏

《Hypertension Research》：Angiotensin III induces disruption of blood-brain barrier integrity in vitro in bEnd.3 brain endothelial cells

本研究利用bEnd.3细胞模型探究Ang III对血脑屏障（BBB）的损伤机制。结果显示，Ang III在10-1000 nM浓度范围内，通过下调claudin-5和Mfsd2a，上调caveolin-1，导致细胞活力下降、紧密连接阻抗降低及荧光素钠渗透增加，证实Ang III通过细胞旁和跨细胞途径破坏BBB完整性，可能参与高血压相关BBB功能障碍。

　　

摘要

高血压众所周知会破坏血脑屏障（BBB）。血管紧张素（Ang II）是导致高血压状态下BBB完整性受损的主要机制因素之一。然而，由Ang II转化而来的Ang III对BBB的影响尚未明确。因此，本研究旨在使用小鼠脑微血管内皮细胞系（bEnd.3）在体外模型中评估Ang III的作用。将bEnd.3细胞暴露于10至1000 nM的Ang III浓度下，分别作用6小时、12小时和24小时后，检测细胞存活率、跨内皮电阻（TEER）以及荧光素钠（NaFl）示踪剂的通透性。通过免疫荧光和Western blotting技术检测claudin-5、caveolin-1（Cav-1）和major facilitator superfamily domain-containing protein 2a（Mfsd2a）的表达情况。结果显示，在所有时间点，Ang III在不同剂量作用下均导致细胞存活率和TEER下降，NaFl通透性增加（P<0.05，P<0.01）。25 nM、50 nM和500 nM浓度的Ang III处理12小时后，claudin-5表达降低，而Cav-1表达升高；500 nM浓度的Ang III处理显著降低了Mfsd2a的表达（P<0.0001）。我们的数据首次证明，在体外条件下，特定浓度和时间的Ang III处理会通过细胞旁途径和细胞内途径改变物质在BBB中的转运，这表明其在高血压状态下可能参与破坏BBB完整性的过程。