蜂王浆蛋白源抗炎肽通过Src/NF-κB信号通路缓解DSS诱导的小鼠结肠炎

《Food Bioscience》：Royal jelly proteins-derived anti-inflammatory peptides protected inflammation in DSS-induced colitis mice through Src/NF-κB signaling pathway

本研究揭示了蜂王浆（RJ）及其主要蛋白（MRJPs）经蛋白酶K水解后产生的活性肽（尤其是KFFDY）在葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎小鼠模型中，通过调控巨噬细胞M2型极化、抑制Src/NF-κB信号通路活化及下游炎症因子释放，显著减轻肠道黏膜屏障损伤和炎症反应，为炎症性肠病（IBD）的治疗提供了新的潜在策略。

　　

Highlight

研究发现，蜂王浆（RJ）和其主要蛋白（MRJPs）的水解产物，特别是蛋白酶K处理MRJPs得到的水解物，在缓解结肠炎方面表现出优异效果。它们能有效减轻肠道黏膜损伤，并通过抑制M2型巨噬细胞的极化、阻断NF-κB信号通路的激活以及减少炎症因子的释放来发挥抗炎作用。

Section snippets

Preparation of different RJ and major royal jelly proteins (MRJPs) hydrolysates

蜂王浆（RJ）样品来自中国农业科学院蜜蜂研究所。将5克RJ溶解于50毫升pH 8.7的PBS缓冲液中，充分混合后离心，上清液经过滤和透析后，获得MRJPs并冻干储存。RJ和MRJPs使用蛋白酶（北京索莱宝科技有限公司）进行水解。将1克样品溶解后，在特定温度和pH条件下与酶反应，之后灭活酶并冻干得到最终的水解产物。

RJ and MRJPs hydrolysates alleviated LPS-induced cell inflammation

我们根据图示方法制备了MRJPs、RJ和MRJPs的水解产物。在水解产物的蛋白电泳图中几乎看不到蛋白条带，这可能是因为蛋白质被水解成了低分子量的肽段（图2A）。红外光谱显示，经过酶水解后，RJ在1636.65 cm^-1和MRJPs在1649.09 cm^-1处的吸收峰发生了明显移动，这可能是由于蛋白质结构被破坏、肽键断裂所致。

Discussion

蜂王浆（RJ）富含多种天然活性成分。除了其本身含有的天然活性肽，酶水解还能释放出更多具有生物活性的肽段。这些生物活性肽因其功效显著且易于吸收而受到广泛关注。我们的研究表明，RJ蛋白水解物，尤其是蛋白酶K水解MRJPs的产物，能有效缓解结肠炎，其核心机制与调控巨噬细胞极化和抑制NF-κB通路密切相关。其中，通过LC-MS/MS等技术筛选出的肽段KFFDY，被证实可能通过作用于靶点Src，影响其磷酸化，进而调控TLR4/NF-κB信号通路，发挥关键的抗炎作用。

Conclusion and future outlooks

总之，蛋白酶（主要是蛋白酶K水解MRJPs的产物）的水解产物能够促进M2型巨噬细胞极化，抑制NF-κB通路激活，从而调节炎症因子释放，抑制小鼠结肠炎症。在蛋白酶K水解RJ和MRJPs的产物中，抗炎肽KFFDY通过抑制Src/NF-κB信号通路来抑制炎症。这一发现为开发针对炎症性肠病（IBD）的新型肽类药物提供了有前景的先导化合物和理论依据。