蜂毒肽在HER2表达乳腺癌细胞中的免疫调节作用及其潜在治疗应用

蜂毒肽对HER2阳性乳腺癌细胞具有显著细胞毒性并诱导凋亡，同时促进M1/M2型巨噬细胞极化，其协同抗肿瘤作用在共培养模型中得到验证，为免疫联合治疗提供依据。

　　

摘要

目的

蜂毒肽（Melittin）是一种由26个残基组成的两亲性肽，是蜜蜂毒液的主要成分，对多种癌细胞具有广泛的细胞毒性作用。在HER2表达的乳腺癌中，M₂/M₁巨噬细胞比例升高可能会促进肿瘤进展。本研究探讨了蜂毒肽在乳腺癌细胞（包括MCF-7和HER2表达的SK-BR-3）中的细胞毒性、诱导细胞凋亡作用以及对巨噬细胞极化的效应，这些实验既在单独使用蜂毒肽的情况下进行，也在巨噬细胞存在的情况下进行。

方法

使用MTT测定法评估了蜂毒肽对MCF-7、SK-BR-3、THP-1和CCD-34Lu细胞的细胞毒性。通过Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术分析来检测该肽的细胞凋亡效应。随后，将THP-1细胞与15 ng/ml的PMA（磷脂酰肌醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯）共培养48小时以分化为M₀巨噬细胞，并用蜂毒肽处理以评估其对巨噬细胞极化的作用。利用Transwell培养板建立了巨噬细胞与MCF-7或SK-BR-3细胞的共培养模型，通过流式细胞术分析了蜂毒肽对巨噬细胞极化和细胞凋亡的影响。

结果

蜂毒肽在MCF-7和SK-BR-3细胞中的细胞毒性作用强于在非恶性细胞系中的作用。细胞凋亡实验证实蜂毒肽能够诱导癌细胞凋亡。此外，蜂毒肽处理促进了M₁和M₂巨噬细胞的极化，共培养模型进一步证明了其能够诱导MCF-7和SK-BR-3细胞中的M₁巨噬细胞生成及细胞凋亡。

结论

这些发现提供了体外证据，表明蜂毒肽可以诱导细胞凋亡并促进抗肿瘤巨噬细胞极化，提示其作为免疫调节剂的潜力，并为未来针对HER2表达乳腺癌的临床前和转化研究提供了支持数据。

图形摘要

目的

蜂毒肽是一种由26个残基组成的两亲性肽，是蜜蜂毒液的主要成分，对多种癌细胞具有广泛的细胞毒性作用。在HER2表达的乳腺癌中，M₂/M₁巨噬细胞比例升高可能会促进肿瘤进展。本研究探讨了蜂毒肽在乳腺癌细胞（包括MCF-7和HER2表达的SK-BR-3）中的细胞毒性、诱导细胞凋亡作用以及对巨噬细胞极化的效应，这些实验既在单独使用蜂毒肽的情况下进行，也在巨噬细胞存在的情况下进行。

方法

使用MTT测定法评估了蜂毒肽对MCF-7、SK-BR-3、THP-1和CCD-34Lu细胞的细胞毒性。通过Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞术分析来检测该肽的细胞凋亡效应。随后，将THP-1细胞与15 ng/ml的PMA（磷脂酰肌醇12-肉豆蔻酸13-乙酸酯）共培养48小时以分化为M₀巨噬细胞，并用蜂毒肽处理以评估其对巨噬细胞极化的作用。利用Transwell培养板建立了巨噬细胞与MCF-7或SK-BR-3细胞的共培养模型，通过流式细胞术分析了蜂毒肽对巨噬细胞极化和细胞凋亡的影响。

结果

蜂毒肽在MCF-7和SK-BR-3细胞中的细胞毒性作用强于在非恶性细胞系中的作用。细胞凋亡实验证实蜂毒肽能够诱导癌细胞凋亡。此外，蜂毒肽处理促进了M₁和M₂巨噬细胞的极化，共培养模型进一步证明了其能够诱导MCF-7和SK-BR-3细胞中的M₁巨噬细胞生成及细胞凋亡。

结论

这些发现提供了体外证据，表明蜂毒肽可以诱导细胞凋亡并促进抗肿瘤巨噬细胞极化，提示其作为免疫调节剂的潜力，并为未来针对HER2表达乳腺癌的临床前和转化研究提供了支持数据。

图形摘要