识别并减少在线亲和微自由流电泳中时间扩展的主要来源

《Analyst》：Identifying and minimizing primary sources of temporal broadening in online affinity micro free-flow electrophoresis

亲和微流控自由电泳（μFFE）通过连续分离实现生物系统实时检测，混合竞争性免疫试剂后在线流送至设备进行实时分离。本研究通过优化流体动力学参数和动态表面涂层技术（0.005% w/v BSA），将分析物响应时间从25秒缩短至9秒（2.7倍提升），并有效抑制试剂表面吸附，使总信号强度提升2.8倍，响应时间进一步优化至30秒。

　　

亲和微流式自由流动电泳（μFFE）利用连续分离技术实现对生物系统的实时检测。竞争性免疫测定试剂在线混合后流入μFFE设备中，其中结合态和游离态的标记物质根据其电泳迁移率实现实时分离。在当前的研究报告中，我们对亲和μFFE平台进行了优化，以最小化检测的响应时间。通过以下两种方式改善了分析物的响应时间：（1）减少分析物在流体系统中传输过程中的时间扩散；（2）降低表面吸附。通过快速调整微流控参数，有效抑制了由于纵向扩散和抛物线流动引起的时间扩散现象。在保证竞争性免疫测定充分平衡的时间的同时，缩短了孵育毛细管的长度，使响应时间从25秒缩短至9秒，时间响应速度提高了2.7倍。当加入免疫测定试剂后，由于肽类物质在表面吸附，检测的响应时间有所下降。实验表明，使用0.005%（重量/体积）的牛血清白蛋白进行动态涂层处理可以减轻表面吸附，且不会干扰免疫测定组分的结合与分离过程，从而使整体信号强度提高了2.8倍，时间响应速度提高了2倍，从61秒缩短至30秒。