Shisa7基因敲低通过调控GABAA受体减弱苯二氮?类及酒精的辨别刺激与强化效应

本研究首次在活体大鼠模型中证实，通过静脉注射Shisa7 DsiRNA实现靶向基因敲低后，可显著减弱苯二氮?（阿普唑仑）、巴比妥（戊巴比妥）及乙醇三种GABAA受体（GABAAR）阳性变构调节剂的辨别刺激效应，并降低乙醇的强化作用，为Shisa7作为神经精神疾病药物新靶点提供了行为药理学证据。

　　

Highlight

GABA_A受体（GABA_AR）辅助蛋白Shisa7的敲低可减弱三种阳性变构调节剂的行为效应

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  Shisa7敲低使乙醇训练大鼠的乙醇剂量-效应曲线下移
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  阿普唑仑训练大鼠中阿普唑仑与戊巴比妥的剂量-效应曲线右移
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  基因敲低未影响反应速率，但显著降低大鼠自愿乙醇摄入量

Subjects

实验选用Envigo公司购买的雄性Long-Evans头巾大鼠，单独饲养于聚丙烯笼内，环境控温控湿并维持12小时光暗循环。所有行为实验均在光周期进行。除实验时段外，大鼠可自由获取饮水。药物辨别实验组通过限制进食维持体重至自由进食的85%。

Effects of PAMs of GABA_AR in the Drug-Discrimination Procedure

乙醇训练组大鼠平均经过29次训练达到标准，阿普唑仑训练组仅需18次。在乙醇训练组中，给予溶剂时大鼠选择药物杠杆的反应百分比均值仅为0.2%，反应速率为2.07次/秒（图1）。阿普唑仑训练组在溶剂 sessions 中的药物杠杆选择率更低（0.03%），反应速率达2.25次/秒。

Discussion

本研究通过静脉注射Shisa7 DsiRNA实现约60%的蛋白敲低，首次在大鼠模型中证明：

1. 1.
   瞬时降低Shisa7可减弱苯二氮?类（阿普唑仑）的行为效应，拓展了既往基因敲除小鼠模型仅针对地西泮的发现；
2. 2.
   三种作用于GABA_AR不同位点的阳性变构调节剂（乙醇、阿普唑仑、戊巴比妥）的辨别刺激效应均被抑制；
3. 3.
   Shisa7敲低特异性影响药物主观效应而非运动功能，且显著降低乙醇强化作用，提示其可能通过调控含α5亚基的GABA_AR介导奖赏通路。

Data Availability

作者声明本研究所有数据均包含于论文中。

Authorship Contributions

Tamara Morris：数据分析、实验操作、论文撰写与修订；Ashley Henderson：实验操作；Sarah Melton：实验操作；Aslan Abdurrahman：实验操作；Ashok Aiyar：概念设计、方法验证、数据分析与监督；Peter Winsauer：课题构思、数据管理、资源协调、论文撰写与修订。

Uncited reference

54.; 55.; 54.; 55..

Acknowledgements

感谢Annamarie Hirschberger在实验完成过程中提供的技术支持。