基于荧光微流控芯片的单细胞外囊泡多重表型分析技术用于高级别浆液性卵巢癌的早期临床诊断

《Sensors and Actuators B: Chemical》：Multiplexed Phenotypic Profiling of Single Extracellular Vesicles for Early Clinical Diagnosis of High-Grade Serious Ovarian Carcinoma

本研究开发了一种荧光微流控芯片单囊泡检测技术（SEAFM），通过对单个细胞外囊泡（EVs）进行CD81、EGFR、CD24和EpCAM四重生物标志物表型分析，实现了对高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）的早期诊断。该技术利用八通道微腔室设计实现高通量EVs捕获，结合荧光成像在单颗粒水平进行定量分析，在42例临床样本中达到0.95灵敏度和0.96特异性（AUC=0.9624），为卵巢癌液体活检提供了创新解决方案。

　　

亮点

微流控平台的设计、功能化与表征

得益于微流控技术在EVs分析中的优势，我们设计了一种PDMS流体层与玻片结合的微流控芯片（图1A）。如图1B所示，该流体层采用单入口单出口设计，入口处设有储液池，可通过泵从出口抽吸引入液体。入口通道的过滤模块可用于过滤杂质，对临床样品尤其有益。

结论

总而言之，我们开发了一种荧光微流控芯片单囊泡检测（SEAFM）方法，用于分析单个EVs上的多种蛋白质。SEAFM的特点包括：i）基于超分辨率显微镜荧光成像的自动化EV计数，快速简便且显著提高定量灵敏度；ii）集成带有过滤器和八个平行微腔室的微流控芯片，实现高通量分析。