L-NAME口服补充加速糖尿病小鼠肾病进展：一种新型可诱导疾病模型的建立与评价

《Biochemical and Biophysical Research Communications》：Oral L-NAME supplementation accelerates the progression of kidney disease in diabetic mice

本研究通过给予2型糖尿病模型小鼠（C57BLKS/J Lepdb）内皮型一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂L-NAME，成功建立了一种加速性、可诱导的糖尿病肾病（DKD）模型。该模型在短期内（3周）即可出现高血压、肾小球滤过率（GFR）下降及蛋白尿，6周后呈现肾小球肥大、系膜扩张、足细胞减少及纤维化等典型DKD病理特征，为快速评估新型干预措施提供了理想平台。

　　

结果

L-NAME治疗导致血压升高、肾功能下降及蛋白尿增加

与对照组相比，接受两种剂量L-NAME治疗的小鼠体重增加更少（图1.A），饮水量也有所减少（图1.B）。血糖水平（图1.C）未受L-NAME浓度影响。

两种剂量的L-NAME均导致脉搏下降（图1.D），但只有80mg/kg/天的剂量显著升高了收缩压（图1.E）。此外，L-NAME治疗显著降低了肾小球滤过率（GFR）（图1.F），并提高了尿 albumin-to-creatinine ratio（图1.G），表明肾功能受损。

L-NAME诱发肾脏组织学病变

肾脏切片的过碘酸雪夫（PAS）染色显示，接受80mg/kg/day L-NAME治疗的小鼠出现了肾小球肥大和系膜扩张。Wilms肿瘤蛋白（WT1）染色则揭示了肾小球内足细胞数量的减少。天狼星红和I型胶原蛋白染色进一步表明，肾脏中纤维化组织和胶原沉积有所增加。

讨论

本研究旨在通过给BKS db/db小鼠服用eNOS抑制剂L-NAME，建立一种可诱导且可重复的糖尿病肾病（DKD） rodent 模型。eNOS^-/-C57BLKS/J Lepr^db DKD小鼠模型是本研究的灵感来源，因其被认为是DKD最具代表性的模型之一。该品系小鼠易出现高血压、肾功能进行性下降和蛋白尿。然而，该遗传模型存在繁殖和维持困难。我们的药理学方法通过使用L-NAME抑制eNOS，在BKS db/db小鼠中模拟了双重缺陷的关键方面，从而提供了一个更灵活的平台。我们的研究结果表明，L-NAME治疗可在3周内加速肾功能障碍的发生，并在6周内引发显著的肾脏病理变化，包括系膜扩张、足细胞丢失和纤维化，这与人类DKD的进展特征非常相似。

结论

总之，我们开发的小鼠模型展现了人类DKD的许多特征。40mg/kg/day和80mg/kg/day的L-NAME均能在治疗3周后诱导蛋白尿和GFR下降。组织学分析表明，80mg/kg/day的剂量在加剧肾损伤方面最为有效，能在治疗6周后引起系膜扩张、足细胞丢失和肾纤维化。由于该DKD模型是可诱导且可调节的，L-NAME可在任何时间点给药，使其成为测试新型DKD干预措施治疗潜力的宝贵工具。