建立一种针对具有复合抗虫性和耐除草剂特性的转基因玉米LD05的特定事件的定量实时PCR检测方法

《Journal of Consumer Protection and Food Safety》：Establishment of an event-specific quantitative real-time PCR method for genetically modified maize LD05 with combined insect resistance and herbicide tolerance

转基因玉米LD05通过插入抗虫基因m2cryAb-vip3A和除草剂耐受基因bar实现双特性，本研究开发实时荧光PCR定量检测方法，检测限达0.05%质量分数和100拷贝，经实验室间验证确认可靠性，为转基因安全监管提供技术支撑。

　　

摘要

由山东省农业科学院独立研发的转基因玉米LD05凭借其抗虫和耐除草剂的双重特性，展现了良好的产业化潜力。这一特性是通过将抗虫基因（m2cryAb-vip3A）和耐除草剂基因（bar）插入其基因组中实现的。建立针对转基因玉米LD05及其衍生物的定量检测方法对于确保转基因作物的安全监管至关重要。在本研究中，我们根据转基因玉米LD05的3′端到侧翼序列设计了特异性引物和Taqan探针。通过引物筛选、特异性测试、PCR系统优化、标准曲线建立以及准确性和精密度评估，开发出了一种实时荧光PCR方法来特异性检测LD05玉米转化体。该方法确定的LD05转基因成分的检测限为质量分数的0.05%，定量检测限为100个拷贝。此外，该方法的可靠性还通过实验室间验证得到了确认。这种高度特异性和准确的定量检测方法为转基因玉米LD05的安全监管提供了可靠的技术支持。