宏基因组下一代测序在独特眼内感染诊断中的革命性突破：一项改变诊疗格局的病例系列研究

《Eye》：Metagenomic next-generation sequencing: a game-changer in the diagnosis of unique intraocular infections

本研究针对眼内感染(IOI)诊断困难、传统方法敏感性低的临床挑战，探讨了宏基因组下一代测序(mNGS)技术在诊断疑难眼内感染中的应用价值。研究人员通过回顾性病例系列研究，发现mNGS能够精准识别常规方法难以检测的病原体，包括STAT3-HIES患者的巨细胞病毒(CMV)视网膜炎、表现为光感受器细胞炎的巴尔通体感染以及法瑞西单抗注射后的多微生物眼内炎。该研究证实mNGS可作为眼内感染诊断的重要补充手段，显著提升诊疗精准度。

　　

眼睛是人类感知世界的重要窗口，然而眼内感染却时刻威胁着这一精密器官的功能。当病原体侵入眼球内部，可能引发严重的炎症反应，甚至导致不可逆的视力损伤。传统诊断方法如微生物培养和聚合酶链式反应(PCR)在面对复杂多变的眼内感染时常常力不从心——培养方法耗时长、敏感性有限，而PCR则受限于预置引物，可能遗漏罕见或非典型病原体。这种诊断困境使得许多眼内感染患者无法得到及时准确的治疗，最终造成视力永久丧失。

在这一背景下，来自以色列特拉维夫苏拉斯基医学中心的研究团队将目光投向了宏基因组下一代测序(mNGS)这一新兴技术。该技术能够无偏倚地检测临床样本中的所有遗传物质，为眼内感染的精准诊断带来了新的希望。他们的研究成果发表在眼科权威期刊《Eye》上，通过三个极具代表性的病例，展现了mNGS在疑难眼内感染诊断中的突破性价值。

研究团队采用回顾性病例系列研究设计，选取2024年在特拉维夫苏拉斯基医学中心就诊的三例疑难眼内感染患者。技术方法的核心在于mNGS检测流程：从前房或玻璃体获取微量眼内液样本后，使用Devin微生物DNA富集试剂盒进行人源核酸去除，接着利用Illumina NextSeq500平台进行测序，每个样本至少产生500万条读长。数据分析采用自主研发的生物信息学流程，包括宿主序列过滤、微生物分类鉴定等关键步骤，最终通过Reads Per Million-ratio(RPM-r)参数判断病原体检出可靠性。

病例1：STAT3-HIES患者的巨细胞病毒视网膜炎

一名43岁男性STAT3信号转导和转录激活因子3(STAT3)相关的常染色体显性高免疫球蛋白E综合征(AD-HIES)患者，因发热和震颤就诊。眼部检查发现双眼均存在视网膜白色病灶、血管闭塞和出血等异常表现。

常规检查未发现心内膜炎证据，但左眼前房穿刺样本的mNGS分析意外检出高水平的巨细胞病毒(CMV)，经PCR验证确认。患者被诊断为双侧CMV视网膜炎伴视网膜血管病变，经缬更昔洛韦和玻璃体内更昔洛韦注射治疗后，视网膜炎症明显好转。

病例2：巴尔通体感染导致的光感受器细胞炎

一名28岁健康女性因左眼视力下降6个月就诊，患者有宠物猫接触史。检查发现左眼黄斑反光暗淡，中周部视网膜存在色素改变。光学相干断层扫描(OCT)显示椭圆体带(EZ)和交错带(IZ)弥漫性破坏，眼底自体荧光(FAF)显示中周部高自体荧光，荧光血管造影(FA)可见血管渗漏，全视野视网膜电图(ERG)显示视锥细胞反应中度降低、视杆细胞反应缺失。

尽管巴尔通体血清学检查反复阴性，前房水mNGS检测出汉赛巴尔通体，PCR验证阳性。患者被诊断为巴尔通体感染导致的光感受器细胞炎、视网膜血管炎和全局视网膜功能障碍。尽管接受了多西环素和利福平联合抗生素治疗以及皮质类固醇治疗，光感受器损伤仍持续存在。

病例3：法瑞西单抗注射后的多微生物眼内炎

一名81岁2型糖尿病男性在接受玻璃体内法瑞西单抗注射4天后出现左眼眼内炎症状。经平坦部玻璃体切除术(PPV)和抗生素注射后，玻璃体培养阴性，但mNGS检出黏膜罗氏菌和成团泛菌两种罕见病原体。经针对性治疗后，感染完全消退，视力改善。

研究结论与讨论部分强调，mNGS技术在疑难眼内感染诊断中具有不可替代的价值。三个病例各具特色：病例1首次报道了STAT3-HIES患者发生CMV视网膜炎，拓展了对该免疫缺陷病感染谱的认知；病例2展示了巴尔通体感染表现为原发性光感受器细胞炎的新型临床表现，尽管积极治疗仍遗留永久性功能损害，提示早期诊断的重要性；病例3则首次报道了法瑞西单抗注射后由两种罕见病原体引起的多微生物眼内炎，展示了mNGS在鉴定复杂感染中的优势。

该研究的创新性在于首次系统描述了mNGS诊断出的三种独特眼内感染表现，为眼科感染性疾病诊断提供了新思路。尽管存在回顾性研究和样本量小的局限性，但研究结果充分证明mNGS能够弥补传统诊断方法的不足，尤其在罕见病原体、混合感染和免疫抑制患者不典型表现等挑战性场景中发挥关键作用。未来需要更大规模的研究进一步验证mNGS对眼内感染患者临床结局的实际影响，但毋庸置疑，这项技术正在重塑眼内感染的诊断范式，为保护患者视力带来新的希望。