靶向递送威灵仙苷AR的外泌体通过抑制mTOR依赖性脂肪生成减轻酒精性肝损伤

《Journal of Drug Delivery Science and Technology》：Targeted Exosomal Encapsulation of Clematichinenoside AR Mitigates Alcohol-Induced Liver Injury by Suppressing mTOR-Dependent Lipogenesis

本研究开发了生姜来源的外泌体（GExo）负载威灵仙苷AR（GExo-AR）的新型肝靶向递送系统。实验证实GExo-AR可通过调节mTOR信号通路显著改善乙醇诱导的肝损伤（ALD），在降低转氨酶（ALT）、抑制脂质积聚（TG/TC）和氧化应激（ROS）方面优于游离AR，为植物源性活性成分的临床应用提供了创新策略。

　　

^亮点

^{AR展现抗酒精性肝损伤的保护特性}

乙醇暴露的斑马鱼幼鱼（32小时）表现出明显的肝脏肿大伴实质变色，提示进行性肝损伤（图1A）。定量组织病理学分析显示AR治疗以剂量依赖方式减轻乙醇诱导的肝毒性（图1B，C）。全胚胎油红O染色结合半定量形态分析证实1.5%乙醇组出现显著肝脂肪变性（图1D）。与乙醇对照组相比，AR治疗组表现出明显的肝脂肪变性改善。

^讨论

前期预实验表明AR对酒精性肝损伤具有肝保护活性。本研究旨在阐明AR抗ALD的保护机制并提高其生物利用度。我们开发了基于生姜外泌体（GExo）的AR靶向递送系统：首先通过超速离心从生姜中分离GExo，并采用聚合物共孵育法进行纯化。透射电镜显示典型杯状形态，纳米颗粒追踪分析显示粒径约150纳米，Western blot检测到外泌体标志蛋白CD63和TSG101。通过超声法制备的GExo-AR包封率达68%，显著改善AR的水溶性和稳定性。细胞实验表明GExo-AR可被肝细胞高效内化，口服后能穿越肠道屏障在肝脏富集。在乙醇诱导的HepG2细胞模型中，GExo-AR在改善细胞活力、降低ALT、抑制脂质积聚（油红O染色、TG、TC）和氧化应激（ROS）方面均优于游离AR。斑马鱼实验进一步证实GExo-AR可更有效缓解肝损伤（组织形态、H&E染色、油红O染色、TG）和氧化应激。网络药理学联合分子对接预测mTOR信号为关键靶点，qPCR和雷帕霉素抑制实验证实GExo-AR通过调控mTOR介导的脂质代谢通路发挥治疗作用。

^结论

我们成功构建了靶向递送威灵仙苷AR的外泌体纳米系统GExo-AR。细胞和斑马鱼模型验证表明，GExo-AR通过双重保护机制缓解乙醇诱导的肝脂肪变性：直接肝细胞保护作用与病理学脂质积聚抑制。整合机制分析揭示其通过mTOR信号通路介导治疗效应，为植物源性活性成分的精准治疗提供了新视角。