脂质筏蛋白质组学研究发现，内皮肌球蛋白-9（MYH9）是低密度脂蛋白跨细胞转运和动脉粥样硬化的调控因子

《Proceedings of the National Academy of Sciences》：Lipid raft proteomics identify endothelial myosin-9 (MYH9) as a regulator of low-density lipoprotein transcytosis and atherosclerosis

MYH9调控低密度脂蛋白跨内皮转运并参与动脉粥样硬化发展，质谱筛选发现其通过影响 caveolin-1 介导的转运过程，基因敲除小鼠和人类转录组数据验证其在早期动脉粥样硬化中的关键作用。

　　

重要性

低密度脂蛋白（LDL）穿过动脉内皮的跨细胞转运是动脉粥样硬化形成的一个关键早期步骤。目前对其调控机制了解甚少。通过对来自人类冠状动脉内皮细胞的富含caveolin-1的膜进行质谱分析，发现MYH9是一个关键的介导因子。抑制或敲低内皮细胞中的MYH9可降低体外LDL的跨细胞转运，并减少体内主动脉弓易发生动脉粥样硬化的区域的LDL沉积。缺乏内皮MYH9的小鼠在主动脉窦和弓部形成的斑块较小。人类转录组数据显示，即使在疾病早期阶段，动脉粥样硬化患者的主动脉中MYH9的水平也高于健康对照组。因此，MYH9参与调控LDL的跨细胞转运，并促进动脉粥样硬化的发生。阐明LDL跨细胞转运的调控机制将有助于找到预防和治疗动脉粥样硬化的靶点。

摘要

背景：在动脉粥样硬化的早期阶段，循环中的低密度脂蛋白（LDL）通过跨细胞转运穿过内皮细胞。这一过程涉及scavenger受体SR-BI和激活素样激酶1（ALK1）对LDL的摄取，同时需要caveolin-1（Cav-1）蛋白的参与。我们通过从经LDL处理的人类冠状动脉内皮细胞（HCAECs）中分离出富含caveolin-1的膜微区，并对其进行质谱分析，从而确定了LDL跨细胞转运的介导因子之一为myosin-9（MYH9）。方法：我们使用总内反射荧光显微镜测量HCAECs的LDL跨细胞转运情况；同时也在缺乏内皮MYH9的小鼠（EC-Myh9^?/?）体内进行了相关实验。此外，我们还利用腺相关病毒（AAV）-CRISPR技术敲除了EC-Myh9^?/?小鼠的肝LDLR基因，并对其进行了动脉粥样硬化研究。结果：人类主动脉内皮细胞的基因本体分析表明MYH9参与了LDL的胞吐过程。无论是通过基因敲低还是药物抑制MYH9，都能抑制LDL的跨细胞转运。MYH9的缺失会导致含有LDL的囊泡在细胞基底积聚；而其过表达则会增加LDL的胞吐。急性注射LDL后，EC-Myh9^?/?小鼠在主动脉弓部积累的LDL量较少。为研究MYH9在动脉粥样硬化中的作用，我们使用AAV-CRISPR技术敲除了EC-Myh9^?/?小鼠的肝LDLR基因，并给它们喂食高脂饮食，结果发现这些小鼠的主动脉弓部斑块更小。人类转录组数据进一步显示，动脉粥样硬化患者的主动脉中MYH9的信使RNA（mRNA）水平高于健康对照组。结论：脂质筏蛋白质组学研究证实MYH9是LDL跨细胞转运的调控因子。MYH9对内皮细胞中的LDL胞吐过程至关重要，并促进了动脉粥样硬化的发生。