可渗透性无冷冻保护剂高密度精子超快速冷冻：新型导管装置与浓缩精子团方法的创新研究

《Cryobiology》：Permeable cryoprotectant-free ultra-rapid freezing of high-density human spermatozoa: novel catheter device and concentrated pellet approaches

本文介绍了一种新型精子冷冻导管（SFC）和浓缩精子团超快速冷冻技术，旨在解决现有无渗透性冷冻保护剂（CPA）超快速冷冻方法处理精子量有限的问题。研究通过比较Cryotop Vial Device（CVD）和SFC在精子悬浮液（S）与精子团（P）冷冻中的应用，证实SFC可实现大容量精子冷冻保存，且精子活力、存活率、DNA碎片指数（DFI）、顶体反应（AR）等参数与传统方法相当，为男性生育力保存提供了新策略。

　　

Highlight

精子超快速冷冻技术无需渗透性冷冻保护剂即可冷冻保存经筛选的无精浆精子。现有方法限于处理低精子量。本研究通过开发新型载体——精子冷冻导管（SFC）及采用浓缩精子团冷冻策略，提升超快速冷冻的精子容量。

Materials and methods

本研究经机构伦理委员会批准（IR.SSU.MEDICINE.REC.1402.095）。获取参与者知情同意后，收集25例正常精液样本，通过手淫取精。禁欲时间为2-7天，依据WHO标准进行分析。排除饮酒、精索静脉曲张及精液分析异常者。

Sperm parameters

共纳入25例正常精子症患者。所有冷冻组精子参数包括前向运动力（83.96±5.012）、存活率（88.92±4.84）和正常形态率（7.000±2.363）均较新鲜样本显著下降（P<0.0001）。比较两种载体：前向运动力在CVD(S)组优于SFC(S)组（67.52±3.44 vs. 60.00±6.564, P=0.001），但CVD(P)与SFC(P)组无显著差异（62.68±7.052 vs. 57.72±9.026, P=0.055）。存活率、形态、DFI、AR和线粒体膜电位（MMP）在悬浮液与精子团组中均无载体间差异。

Discussion

自精子超快速冷冻技术问世以来，多种载体与方法被开发以优化该技术。一项Meta分析表明，该技术比传统冷冻法更能有效保存精子总运动力和前向运动力，且通常涉及无精浆和非渗透性冷冻保护剂的精子保存。虽然最小体积并非临床主要关注点，但高容量冷冻需求尚未被充分解决。

Conclusion

本研究证实了使用Cryotop Vial Device（CVD）和精子冷冻导管（SFC）进行精子团超快速冷冻的有效性。这些方法可在极小体积内冷冻高浓度精子，应对临床生育力保存（尤其对癌症患者等精子量有限者）中常见的大样本量挑战。尽管有效，该技术仍会损害精子DNA完整性及功能参数，需进一步优化以提升临床应用潜力。