药用真菌Cs-HK1菌丝发酵胞外多糖EPS-LM-n的结构特性及其降血糖与抗氧化活性研究

《Carbohydrate Polymers》：Structural characteristics and bioactivities of an exopolysaccharide from mycelial fermentation of a medicinal fungus Cs-HK1

本文报道了从药用真菌Cs-HK1菌丝发酵胞外多糖中分离纯化得到的中性多糖EPS-LM-n，其具有独特的→2)-α-Manp-(1→骨架结构，并通过抑制α-淀粉酶（α-amylase）和α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）（IC50分别为0.64和0.74 mg/mL）展现显著降血糖潜力，同时通过清除ROS、保护人血管内皮细胞EA.hy926免受H2O2损伤，证实其抗氧化及心血管保护作用，为天然多糖在代谢性疾病（如高血糖、心血管疾病CVDs）治疗中的应用提供新候选物。

　　

研究亮点

化学试剂

铁（II）硫酸七水合物、铁（III）氯化六水合物、氘代水（D₂O）、抗坏血酸、青霉素、链霉素、脂多糖（LPS）、磺胺、N-1-萘基乙二胺二盐酸盐购自Sigma-Aldrich公司（美国密苏里州）。ABTS（2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）购自Roche公司（德国曼海姆），Trolox（（S）-6-羟基-2,5,7,8-四甲基色满-2-羧酸）购自Calbiochem公司（美国圣地亚哥）。

EPS-LM-n的分离与纯化

EPS-LM是从Cs-HK1菌丝发酵液中提取的粗低分子量胞外多糖组分。经DEAE-52色谱分离后，得到两个独立峰，命名为EPS-LM-1和EPS-LM-2（图1A）。EPS-LM-1为水洗脱的中性多糖。随后，将峰较高的EPS-LM-1通过Sephadex G-200凝胶柱进一步纯化，获得主峰（图1B），命名为EPS-LM-n。其糖含量为79.50±0.01%，核酸和蛋白质污染可忽略。

结论

本研究从Cs-HK1胞外多糖的低分子量组分中成功分离纯化出一种中性、富含甘露糖的杂多糖EPS-LM-n，其均分子量为417 kDa，结构解析显示其以甘露糖残基为主链，并带有葡萄糖和半乳糖分支。据我们所知，此类中性富甘露糖多糖结构在虫草属真菌中尚未见报道。

作者贡献声明

顾芳婷： 原创写作、方法设计、实验操作、概念提出。李俊辉： 方法建立与实验。赵子晨： 方法支持。朱彦瑜： 方法实施。黄林曦： 方法协助。吴建勇： 审稿修订、项目指导、资金管理与监督。

利益冲突声明

作者声明无已知可能影响本研究的财务或个人关系冲突。

致谢

本研究获香港理工大学资助，并感谢该校化学与环境分析大学研究设施（UCEA）的技术支持，特别是应用生物与化学技术系的陈俊明博士。