综述：非编码RNA在口腔鳞状细胞癌免疫治疗耐药中的作用及靶向策略

本综述系统阐述了非编码RNA（ncRNA）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）免疫检查点抑制剂（ICIs）耐药中的核心作用。文章详细剖析了microRNA（miRNA）、长链非编码RNA（lncRNA）和环状RNA（circRNA）通过调控免疫检查点（如PD-L1）、诱导T细胞耗竭、重塑肿瘤微环境（TME）及增强肿瘤细胞内在耐药性等多重机制介导免疫逃逸。同时，综述探讨了靶向ncRNA（如使用反义寡核苷酸ASOs、miRNA mimics）及其与ICIs联用等治疗策略的潜力与挑战，为克服OSCC免疫治疗耐药提供了新的见解和方向。

　　

在口腔鳞状细胞癌（OSCC）的治疗领域，免疫检查点抑制剂（ICIs）的应用标志着一种革命性的进步。然而，原发性或获得性耐药仍然是影响其疗效的主要障碍，仅有10%-20%的OSCC患者能从ICI单药治疗中获益。近年来的研究逐渐揭示，非编码RNA（ncRNAs）——包括microRNA（miRNA）、长链非编码RNA（lncRNA）和环状RNA（circRNA）——在这一复杂的耐药网络中扮演着至关重要的角色。

核心机制：ncRNA介导的免疫治疗耐药

ncRNAs通过多种相互关联的机制，精细地调控着OSCC的免疫逃逸过程。

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  ncRNA对免疫检查点通路的调控
  PD-1/PD-L1通路是免疫治疗的关键靶点。研究表明，特定的ncRNAs能够直接或间接地调节PD-L1的表达。例如，miR-495-3p可直接靶向PD-L1 mRNA，其功能丧失会导致PD-L1上调。而致癌性circRNA CircKRT1则可通过“海绵”吸附miR-495-3p，解除其对PD-L1的抑制，从而促进免疫逃逸。lncRNA如IFITM4P则更为复杂，其在细胞质中通过激活NF-κB信号通路，在细胞核中通过表观遗传学抑制PTEN表达，共同导致PD-L1的上调。此外，MALAT1、HOTAIR等明星lncRNA也通过ceRNA机制或影响信号通路等方式参与PD-L1的调控。
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  T细胞耗竭与功能抑制
  细胞毒性CD8⁺ T细胞（CTLs）的功能耗竭是免疫失效的核心环节。除了PD-1/PD-L1通路，ncRNAs也调控其他耗竭标志物。例如，lncRNA CRNDE在肿瘤浸润CD8⁺ T细胞中高表达，通过吸附miR-545-5p，解除其对TIM-3的抑制，进而加剧T细胞耗竭。在调节性T细胞（Tregs）方面，circRNA hsa_circ_0069313可通过miR-325-3p/Foxp3轴，不仅增强肿瘤细胞自身PD-L1表达，还能通过外泌体传递给Tregs，稳定其关键转录因子Foxp3的表达，从而增强免疫抑制功能。
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  免疫抑制微环境的重塑
  ncRNAs通过驱动代谢重编程和调控髓系细胞， actively塑造着不利于免疫细胞攻击的肿瘤微环境（TME）。
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    代谢重编程：OSCC细胞表现出活跃的糖酵解（Warburg效应）。ncRNAs通过调控葡萄糖转运体（如GLUT1）和关键酶（如HK2, LDHA）来影响这一过程。例如，m6A修饰的circFOXK2可增强GLUT1 mRNA的稳定性，而lncRNA DANCR通过海绵miR-125b-5p上调HK2，共同促进乳酸堆积，创造抑制T细胞功能的酸性环境。
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    髓系细胞介导的屏障：髓源性抑制细胞（MDSCs）和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）是TME中的主要抑制性群体。ncRNAs精细调控其分化和功能。例如，miR-21通过靶向PTEN间接激活STAT3，促进MDSCs的扩增和功能。lncRNA MALAT1可通过吸附miR-140促进TAMs向M2表型极化及血管生成。肿瘤细胞来源的外泌体可作为ncRNAs的载体，在细胞间通讯中发挥关键作用。
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  肿瘤细胞内在耐药机制
  ncRNAs还通过影响肿瘤细胞的内在特性来介导耐药。
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    表观遗传重塑：ncRNAs与表观遗传修饰酶（如DNMTs, EZH2）存在广泛交互。例如，lncRNA HOTAIR可招募PRC2复合物（含EZH2）至靶基因启动子区，催化H3K27me3修饰，沉默肿瘤抑制基因。反之，miR-148a-3p等可靶向DNMT1，影响DNA甲基化水平。
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    癌症干细胞（CSC）特性：CSCs与治疗抵抗和复发密切相关。ncRNAs是CSC干性维持的关键调节因子。在OSCC中，let-7和miR-200家族可抑制干性，而miR-21和lncRNA HOTAIR则促进CSC特性，并通过调控凋亡抵抗等机制增强其生存能力。CSCs低表达MHC分子的特性也可能受到ncRNAs的间接调控。

靶向ncRNAs的治疗策略

针对ncRNAs在耐药中的作用，研究者们开发了多种干预策略。

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  抑制致癌性ncRNAs：使用反义寡核苷酸（ASOs）直接靶向降解或封闭MALAT1、HOTAIR等致癌性lncRNA的功能；开发小分子抑制剂间接干预其功能（如EZH2抑制剂影响HOTAIR的表观遗传调控）；利用CRISPR/Cas9系统（如CRISPRi）进行基因沉默。
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  恢复抑癌性ncRNAs：合成miRNA mimics（如miR-34a mimics）来恢复其肿瘤抑制功能；通过病毒载体或非病毒载体（如脂质纳米粒LNPs、工程化外泌体）递送抑癌性ncRNAs（如lncRNA GAS5）。
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  联合治疗：将ncRNA靶向治疗与ICIs联用是最具潜力的策略之一。例如，抑制某个上调PD-L1的ncRNA可能重新激发肿瘤对anti-PD-1/PD-L1抗体的敏感性。与化疗或放疗的联合也显示出协同潜力。

挑战与未来方向

尽管前景广阔，但ncRNAs的临床转化仍面临诸多挑战。包括：需要单细胞测序和空间转录组学等技术更精确地解析ncRNA在TME异质性细胞中的功能；开发安全、高效、靶向性强的体内递送系统以克服递送瓶颈；进行严格的功能验证和机制研究；开展大规模临床研究验证ncRNAs作为诊断、预后和预测性生物标志物的价值（如唾液中的miRNAs、lncRNAs和circRNAs）；以及利用人工智能（AI）整合多组学数据来指导个性化治疗。

总之，ncRNAs是OSCC免疫治疗耐药网络中的关键节点。深入理解其作用机制，并发展有效的靶向策略，有望为克服OSCC的免疫治疗耐药，改善患者预后开辟新的道路。