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通过可切换程序控制的微生物荧光生物传感器实现动态D-阿洛糖监测
《Biotechnology and Bioengineering》:Dynamic D-Allose Monitoring Via a Toggle-Programmed Microbial Fluorescent Biosensor
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年10月28日 来源:Biotechnology and Bioengineering 3.6
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微生物荧光传感器用于动态监测发酵液中的d-醛糖,通过alsR启动子调控GFP与T7 RNA聚合酶的表达,采用可快速响应的mGFP-DAS作为报告蛋白,显著提升检测灵敏度和效率,较传统色谱法更具优势。
近年来,利用微生物发酵合成稀有糖类受到了广泛关注。d-阿洛糖(d-Allose)作为一种稀有的单糖,因其独特的健康益处和生理功能,在食品和制药行业中成为重要的生物产物。然而,目前检测发酵液样品中的d-阿洛糖主要依赖于复杂的色谱技术。本研究介绍了一种可编程的微生物荧光生物传感器,用于动态监测d-阿洛糖的存在。该生物传感器以位于alsRBACEK操纵子中的d-阿洛糖感应型PalsR启动子为核心组件。随后,利用天然的PT7启动子和PalsR启动子分别表达绿色荧光蛋白(GFP)和T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)。此外,还使用了组成型Ppdc启动子在细胞质中过表达抑制蛋白AlsR,从而确保对PalsR的有效调控。更重要的是,研究人员用快速折叠和降解的mGFP-DAS替代了GFP作为报告分子,使得在连续微生物培养过程中能够快速响应d-阿洛糖的变化。实验结果表明,这种新型生物传感器对d-阿洛糖的检测具有高灵敏度,测量偏差控制在15%以内。与传统基于色谱技术的检测方法相比,该方法在操作简便性和成本效益方面具有显著优势。
作者声明不存在利益冲突。
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