中国仓鼠卵巢细胞中抗体糖基化的调节：实验和计算分析提供了机制上的见解

《Biotechnology Journal》：Modulation of Antibody Glycosylation in Chinese Hamster Ovary Cells: Experimental and Computational Analyses Provide Mechanistic Insights

糖基化调控机制研究：CHO-K1细胞通过补充锰和半乳糖协同增强GalNAc型糖基化，动态模型揭示UTP浓度限制和UDP-Gal竞争抑制影响高Man5糖链合成。

　　

摘要

工艺条件和细胞培养基成分对糖基化过程的影响至今仍不甚明了。在本研究中，我们评估了生产阿达利姆单抗（Humira的抗TNF抗体的生物类似物）的CHO-K1克隆的糖链分布情况。为了调节糖链组成，我们在细胞培养基中添加了锰和/或半乳糖。锰和半乳糖均能增加糖基化程度，且这种效应具有协同作用。值得注意的是，即使半乳糖化程度相似，这些克隆中的Man5（一种高甘露糖糖链）含量也高于Humira中的水平。qPCR分析显示，不同生产性能克隆之间的糖基化酶浓度差异很小，即使添加了50 μM的锰也是如此。我们利用动态数学模型对糖基化途径进行了建模，以阐明高甘露糖糖链增加的机制，并开发出更有效的培养调控方法。模型结果表明，活性糖成分之一的三磷酸尿苷（UTP）的浓度是限制因素；而增加二磷酸尿苷（UDP）-半乳糖的添加会导致UDP-N-乙酰葡萄糖胺的减少，从而限制复杂糖链的合成。

利益冲突

作者声明不存在利益冲突。