囊性纤维化患者呼吸道中Dubliniensis念珠菌和白色念珠菌的流行情况及抗真菌敏感性特征

《Microbiology Spectrum》：The prevalence and antifungal susceptibility profile of Candida dubliniensis and Candida albicans in the respiratory tract of patients with cystic fibrosis

囊性纤维化（CF）患者痰液中酿酒酵母和都柏林酵母的流行病学及抗真菌药敏性分析，发现两者 colonization 未显著影响肺功能（FEV1），但伊曲康唑耐药率较高（11%和20%）。研究还评估了氟康唑、伏立康唑等六种抗真菌药物对这两种酵母的敏感性，显示伏立康唑MIC值最低（0.008-0.25μg/mL），氟康唑和伊曲康唑对都柏林酵母的MIC值高于酿酒酵母。

　　呼吸系统感染是囊性纤维化（CF）患者中最常见的致病因素，严重威胁着患者的健康和生命。在CF患者的痰液中，常分离出多种致病性细菌和真菌，如铜绿假单胞菌（*Pseudomonas aeruginosa*）、金黄色葡萄球菌（*Staphylococcus aureus*）以及多种酵母菌和丝状真菌。尽管细菌感染一直是研究的重点，但近年来，真菌感染在CF患者中的发生率显著上升，这可能与微生物学检测技术的进步和标准化有关。然而，酵母菌在CF患者中的临床意义尚未完全明确，尤其是在肺部感染方面的作用仍需进一步探讨。此外，临床环境中真菌耐药性的出现已成为全球性的公共卫生问题，尤其是某些酵母菌如光滑念珠菌（*Candida glabrata*）对唑类抗真菌药物的耐药性显著增加，而一种多药耐药的真菌——耳念珠菌（*Candida auris*）的出现更增加了这一问题的复杂性。

本研究旨在调查CF患者痰液中酵母菌的流行情况，重点关注耳念珠菌（*Candida dubliniensis*）和白色念珠菌（*Candida albicans*）的分离情况，并评估它们对多种抗真菌药物的敏感性。研究共收集了193名CF患者的968份培养阳性的痰液样本，时间跨度为一年。通过使用矩阵辅助激光解吸电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF MS）对真菌分离株进行物种水平鉴定，并采用Sensititre YeastOne试剂盒对分离出的酵母菌进行抗真菌药物敏感性测试。结果显示，*C. dubliniensis*在样本中占比13%，而* C. albicans*占比高达32%，是CF患者中最常见的两种真菌。此外，*Exophiala dermatitidis*也占一定比例，约为12%。在细菌方面，金黄色葡萄球菌（*S. aureus*）最为常见，占61%，其次是铜绿假单胞菌（*P. aeruginosa*）和黏液型铜绿假单胞菌，分别占27%和14%。

值得注意的是，本研究发现，*C. dubliniensis*和* C. albicans*的定植并不显著影响CF患者的肺功能，这与之前某些研究的结果存在差异。例如，一项研究曾发现* C. dubliniensis*的定植与肺功能下降相关。然而，本研究中未发现肺功能指标（如FEV1，即用力呼气容积第一秒）在这些真菌定植患者中出现明显差异。这一结果提示，尽管* C. dubliniensis*和* C. albicans*在CF患者的呼吸道中普遍存在，但它们对肺功能的直接影响可能不如某些细菌感染明显。此外，研究还发现，尽管某些酵母菌可能表现出抗真菌药物耐药性，但整体耐药水平较低，尤其在使用欧洲抗微生物药物敏感性试验协作组（EUCAST）标准进行判断时，*C. albicans*和* C. dubliniensis*中只有少数个体对某些药物表现出耐药性。

在抗真菌药物敏感性测试中，研究者使用了六种抗真菌药物：氟康唑（fluconazole）、伊曲康唑（itraconazole）、伏立康唑（voriconazole）、卡泊芬金（caspofungin）、5-氟胞嘧啶（5-flucytosine）和两性霉素B（amphotericin B）。结果显示，伏立康唑对这两种酵母菌的最低抑菌浓度（MIC）最低，表明其可能是治疗CF患者真菌感染的有效药物。相比之下，伊曲康唑对* C. albicans*表现出较高的MIC值，这意味着伊曲康唑在治疗* C. albicans*感染时可能效果有限。研究中还提到，某些真菌耐药性的差异可能与不同抗真菌药物检测方法的差异有关，例如EUCAST和CLSI标准在培养基葡萄糖浓度、真菌细胞密度以及检测仪器使用等方面的细微差别，可能导致结果的不一致。不过，Sensititre方法已被证明与CLSI参考方法具有高度一致性，这为临床应用提供了可靠依据。

此外，研究者还分析了患者的人口学特征和临床数据，包括性别、年龄、CFTR基因型、肺功能指标（FEV1）、体重指数（BMI）以及是否接受CFTR调节剂治疗。数据显示，*C. dubliniensis*和* C. albicans*的定植在性别上没有显著差异，但两者在年龄分布上有所不同。*C. dubliniensis*的定植率随年龄增长而增加，尤其是在50岁以上的患者中更为常见，而* C. albicans*则主要在31至40岁之间达到峰值。这可能与不同年龄段患者免疫状态、感染风险或微生物生态的变化有关。同时，研究发现，接受高效CFTR调节剂治疗的患者中，*C. dubliniensis*的定植率较高，这可能与药物对肺功能的改善有关，从而减少了某些真菌感染的潜在影响。

本研究还注意到，*C. dubliniensis*和* C. albicans*的定植并不与患者是否接受抗真菌治疗或吸入性抗生素治疗相关，这表明在当前的临床实践中，这些真菌的定植并未成为抗真菌治疗的常见指征。然而，研究者指出，尽管抗真菌药物耐药性在CF患者中总体较低，但某些药物如伊曲康唑的耐药性仍然值得关注。特别是在使用EUCAST标准时，11%的* C. albicans*和20%的* C. dubliniensis*被归类为耐药菌株，这提示在某些情况下，可能需要更谨慎地选择抗真菌药物，以避免治疗失败。

CFTR调节剂的使用情况也是本研究的一个重要方面。在瑞典，这类药物尚未广泛普及，仅在极少数严重病例中使用。因此，研究结果可能受到这一背景的影响。此外，研究还发现，*C. dubliniensis*定植患者中，有较高比例的患者同时定植了*P. aeruginosa*和* S. aureus*，这可能意味着某些微生物群落的共存与CF患者的病情发展有关。然而，这些微生物的共同存在并未对肺功能产生显著影响，这表明CF患者呼吸道中的微生物多样性可能对疾病进程的影响尚不明确。

研究者进一步指出，本研究存在一定的局限性。首先，样本数量有限，特别是在抗真菌药物敏感性测试中，仅对* C. dubliniensis*和* C. albicans*进行了分析，而其他真菌种类未被详细探讨。其次，由于研究数据是横断面的，无法评估真菌定植与肺功能变化之间的动态关系。因此，未来的研究需要扩大样本规模，并采用更长时间的随访设计，以更全面地了解CF患者呼吸道中真菌的生态变化及其对疾病进展的影响。

在临床实践中，CF患者常面临多重微生物感染的风险，包括细菌和真菌。由于CF患者的肺部环境具有高黏性、低氧和高盐分的特点，这为微生物的定植和繁殖提供了有利条件。因此，了解CF患者呼吸道中真菌的分布、种类及其抗真菌药物敏感性对于制定合理的治疗策略至关重要。尤其是在抗真菌药物的选择上，研究结果提示伏立康唑可能是治疗* C. dubliniensis*和* C. albicans*感染的首选药物，而伊曲康唑的使用可能需要更加谨慎。

本研究的结果对于CF患者的临床管理具有重要意义。首先，它表明在CF患者中，*C. dubliniensis*和* C. albicans*的定植并不显著影响肺功能，这意味着在某些情况下，可能不需要对这些真菌进行过度干预。然而，抗真菌药物的耐药性问题仍需关注，特别是在某些药物如伊曲康唑的应用中。其次，研究者强调，随着CFTR调节剂的普及，这些药物可能对呼吸道微生物群落产生影响，从而改变真菌的定植模式和抗药性特征。因此，未来的研究应进一步探讨CFTR调节剂对真菌感染的影响，并结合更广泛的临床数据，以优化抗真菌治疗方案。

此外，研究还提到，CF患者中真菌的定植可能与环境因素密切相关。例如，*E. dermatitidis*的流行率在不同地区存在差异，这可能与当地的气候、地理位置以及患者的生活环境有关。因此，针对不同地区的CF患者，可能需要采取不同的监测和干预策略，以有效应对真菌感染的风险。

总的来说，本研究为CF患者呼吸道中酵母菌的流行情况和抗真菌药物敏感性提供了重要的数据支持。尽管* C. dubliniensis*和* C. albicans*在CF患者中较为常见，但它们的定植似乎并未对肺功能产生显著影响，这为临床医生在评估CF患者感染风险时提供了新的视角。同时，抗真菌药物的敏感性分析结果提示，某些药物如伏立康唑可能在治疗这些真菌感染方面具有较好的效果，而伊曲康唑的耐药性问题则需要引起重视。这些发现不仅有助于提高对CF患者真菌感染的认识，也为未来的治疗策略和预防措施提供了科学依据。