氢-氘交换质谱法的综合内部标准

《Analytical Chemistry》：Comprehensive Internal Standards for Hydrogen–Deuterium Exchange Mass Spectrometry

本研究设计并合成了八种新型咪唑啉基内部交换报告物（IERs），用于氢-氘交换质谱（HDX-MS）中直接测量交换条件，时间范围覆盖毫秒至数天，并验证其色谱性能。通过对比实验证明，这些IERs和配套计算工具能有效提升蛋白质动力学模型的准确性。

　　

氢-氘交换质谱（HDX-MS）是一种广泛用于研究蛋白质结构和动态的工具，但不同实验条件、仪器平台和实验室之间的数据可比性仍然具有挑战性。在这里，我们设计、合成并验证了一组基于咪唑的体内交换报告分子（IERs），这些报告分子可以方便地与HDX-MS结合使用，以直接测量交换条件。这组八个IERs每个都具有一个可交换的位点，能够覆盖从毫秒到天级的极宽时间范围，并且还表现出理想的色谱行为。我们通过一系列涉及已充分研究的蛋白质的比较HDX-MS研究证明了这些IERs及其相关计算工具的实用性，在这些研究中，反应条件（如pH值和氘含量）被人为改变。通过明确参考交换反应条件，这套新的内部标准使得跨实验的严格比较成为可能，并将提高基于HDX-MS的蛋白质动态模型的准确性。