环状RNA circSLC39A10通过miR-936/PROX1/β-catenin轴激活Wnt信号通路促进前列腺癌进展

《Cellular & Molecular Biology Letters》：Circular RNA circSLC39A10 promotes prostate cancer progression by activating Wnt signaling via the miR-936/PROX1/β-catenin axis

本研究针对前列腺癌(PCa)中circRNAs功能机制不清的问题，聚焦新发现的circSLC39A10，通过体内外实验证实其通过吸附miR-936解除对PROX1的抑制，进而促进β-catenin核转位激活Wnt信号通路，显著促进PCa增殖、侵袭和转移。该研究首次揭示circSLC39A10/miR-936/PROX1/β-catenin调控轴，为PCa诊断标志物和靶向治疗提供新策略。

　　

前列腺癌(PCa)作为男性常见的恶性肿瘤，其临床异质性给治疗带来巨大挑战，尤其是castration-resistant prostate cancer(CRPC，去势抵抗性前列腺癌)和neuroendocrine prostate cancer(NEPC，神经内分泌前列腺癌)的出现往往意味着预后不良。近年来，环状RNAs(circRNAs)因其独特的共价闭合环状结构和高度稳定性，在癌症发生发展中展现出重要调控潜力，成为肿瘤研究的新焦点。然而，circRNAs在前列腺癌中的具体功能和分子机制尚需深入探索。Wnt/β-catenin信号通路作为调控细胞增殖、分化的关键通路，在前列腺癌的发生发展和去势抵抗形成中扮演重要角色，但其与circRNAs的相互作用网络仍有待解析。

为解决上述问题，Chen等人发表在《Cellular & Molecular Biology Letters》的研究首次系统揭示了circSLC39A10（hsa_circ_0057553）在前列腺癌中的致癌作用及分子机制。研究人员通过生物信息学分析发现circSLC39A10在PCa组织和细胞系中显著高表达，且与高级别肿瘤、高Gleason评分等不良临床特征密切相关。为阐明其功能，研究团队运用了多种关键技术：利用78对PCa临床样本进行表达验证；通过体内外功能实验（包括细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡检测及裸鼠移植瘤模型）评估表型影响；采用RNA sequencing(RNA测序)筛选下游通路；结合生物信息学预测和实验验证（双荧光素酶报告基因、RNA immunoprecipitation(RIP，RNA免疫沉淀)、Chromatin immunoprecipitation(ChIP，染色质免疫沉淀)等）阐明分子互作网络。

Characteristics of circSLC39A10 in PCa tissues and PCa cell lines

研究首先证实circSLC39A10来源于SLC39A10基因，由exon 2-exon 9反向剪接形成，其环状结构赋予其RNase R抗性和长半衰期特性。临床样本分析显示61.53%(48/78)的PCa组织中circSLC39A10显著上调，尤其在雄激素非依赖性细胞(PC3、DU145)中表达更高。亚细胞定位表明circSLC39A10主要分布于细胞质，提示其可能作为竞争性内源RNA(ceRNA)发挥作用。

circSLC39A10 promotes the proliferation,migration,and invasion of PCa cells in vitro

功能实验表明，敲低circSLC39A10显著抑制PC3和DU145细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力，并促进细胞凋亡。CCK-8、Transwell和伤口愈合实验一致证实其致癌功能。

The oncogenic effect of circSLC39A10 in subcutaneous and metastatic tumor models

体内实验进一步验证了circSLC39A10的促癌作用。裸鼠皮下移植瘤模型显示，敲低circSLC39A10使肿瘤体积和重量减少约60%，Ki67表达显著降低。尾静脉注射模型证实敲低circSLC39A10可有效抑制肺转移结节形成。

circSLC39A10 promotes the malignant behavior of PCa cells via modulating Wnt signaling

RNA测序和KEGG通路富集分析发现，circSLC39A10敲低显著影响Wnt信号通路相关基因表达。Western blot和qPCR证实敲低circSLC39A10降低β-catenin(CTNNB1)、Wnt3a、Wnt5a及下游靶基因c-Myc、CyclinD1、ZEB1的表达，而过表达则产生相反效果。免疫荧光显示circSLC39A10促进β-catenin核转位。

circSLC39A10 acts as a sponge for miR-936 in PCa cells

机制研究表明，circSLC39A10作为分子海绵直接结合miR-936，双荧光素酶报告基因和AGO2-RIP实验验证了这一相互作用。临床样本中circSLC39A10与miR-936表达呈负相关。功能回复实验证实miR-936抑制剂可逆转circSLC39A10敲低对Wnt通路基因的抑制作用。

PROX1 is a functional target of the circSLC39A10/miR-936 axis in PCa cells

进一步研究发现，PROX1(prospero-related homeobox 1)是miR-936的直接靶标。双荧光素酶报告基因证实miR-936通过结合PROX1 3'UTR抑制其表达。临床样本中PROX1与miR-936负相关，与circSLC39A10正相关。过表达PROX1可逆转circSLC39A10敲低对细胞恶性表型的抑制作用。

circSLC39A10 activates Wnt signaling through PROX1-mediated activation of CTNNB1 transcription in PCa cells

深入机制探讨发现，PROX1作为转录因子直接结合CTNNB1启动子区域（预测4个结合位点），ChIP实验证实PROX1可促进CTNNB1转录。circSLC39A10通过miR-936/PROX1轴调控β-catenin核转位及其下游靶基因转录活性。

研究结论部分强调，circSLC39A10通过ceRNA机制吸附miR-936，解除其对PROX1的抑制，进而促进PROX1介导的CTNNB1转录激活和β-catenin核转位，最终激活Wnt信号通路驱动前列腺癌进展。该研究首次完整揭示了circSLC39A10/miR-936/PROX1/β-catenin调控轴在前列腺癌中的作用，为circRNA作为诊断生物标志物和治疗靶点提供了理论依据。尤其值得注意的是，circSLC39A10在雄激素非依赖性前列腺癌细胞中高表达，提示其可能参与去势抵抗性前列腺癌的发生发展，为克服晚期前列腺癌治疗耐药提供了新思路。

该研究的创新性在于发现了一个新的致癌性circRNA分子，并系统阐明了其在前列腺癌中从表观遗传调控到转录激活的多层次作用机制。circSLC39A10/miR-936/PROX1/β-catenin轴的发现不仅加深了对前列腺癌发病机制的理解，也为开发针对该通路的靶向治疗策略奠定了坚实基础。未来基于该调控轴的诊断试剂和靶向药物的开发，有望为前列腺癌患者提供新的治疗选择。