多重成像质谱流式细胞术揭示了成人型卵巢颗粒细胞肿瘤中肿瘤-免疫微环境依赖性的激素受体表达 开放获取

《Cancer Research Communications》：Multiplexed Imaging Mass Cytometry Reveals Tumor-immune Microenvironment–dependent Hormone Receptor Expression in Adult-Type Ovarian Granulosa Cell Tumors Open Access

成人型颗粒细胞瘤（AGCT）的肿瘤微环境（TME）通过成像质谱细胞术（IMC）分析显示存在两种亚型（AGCT-1和AGCT-2），差异主要在于FOXL2+COL1A1+细胞的分布、激素受体（PR/ERα）表达及转录组特征。AGCT-2亚型呈现更高胶原富集区域和PR表达，可能与复发相关。免疫细胞组成和细胞间相互作用分析进一步揭示亚型间的TME异质性，为个性化治疗提供新靶点。

　　在本研究中，科学家们针对一种罕见的卵巢肿瘤——成人型颗粒细胞瘤（Adult-type Granulosa Cell Tumors, AGCT）的微环境进行了深入分析。通过使用一种34个标记物的成像质量分析技术（Imaging Mass Cytometry, IMC），研究人员对24个AGCT样本中的130个区域进行了分析，总共检测了超过90万个单细胞，从而揭示了AGCT肿瘤微环境的结构特征和细胞间相互作用的复杂性。这项研究为理解AGCT的生物学行为提供了新的视角，并可能为个性化治疗策略的制定奠定基础。

AGCT是一种罕见的卵巢性索间质肿瘤，约占所有卵巢癌的2%至5%。这类肿瘤在复发时往往难以治愈，因为缺乏有效的系统性治疗手段，且复发的预测和预防存在较大挑战。现有的治疗方式包括手术减瘤、化疗和激素治疗，但这些方法通常效果有限，且分子层面的临床可操作性基因变异在AGCT中并未发现高频出现。由于AGCT的罕见性，专门针对其治疗的研究和临床试验较少，导致缺乏有效的、基于证据的治疗选择。因此，深入研究AGCT的微环境结构和细胞组成具有重要意义。

研究人员发现，AGCT的微环境表现出“冷”免疫特征，即免疫细胞浸润程度较低。与原发性肿瘤相比，复发性AGCT中巨噬细胞的丰度更高。此外，肿瘤组织结构存在显著的异质性，包括FOXL2+细胞在富含胶原蛋白的区域中分布的差异，这可能反映了肿瘤微环境的复杂性。基于这些微环境组成特征，研究者将AGCT分为两种亚型：AGCT-1和AGCT-2。这两种亚型在FOXL2+细胞的分布、孕酮受体（PR）和雌激素受体α（ERα）的表达，以及转录组特征上均存在显著差异。这一发现表明，肿瘤微环境的内在特性可能比肿瘤本身的分类更能反映其分子差异，从而为AGCT的精准治疗提供依据。

研究团队还分析了激素受体的表达模式，发现AGCT-2亚型的胶原蛋白富集区域中PR表达显著高于AGCT-1亚型。这提示了肿瘤微环境可能对激素治疗的反应具有影响，特别是FOXL2+COL1A1+细胞可能在调节激素信号通路和细胞外基质（ECM）动态方面发挥关键作用。此外，研究者还观察到，在AGCT-2中，FOXL2+COL1A1+细胞表现出更高的αSMA和FAP表达，这可能意味着这些细胞具有类似癌相关成纤维细胞（CAF）的特征。相比之下，AGCT-1中FOXL2+COL1A1+细胞的表达则更接近于经典AGCT细胞。这些结果进一步表明，AGCT的亚型划分可能不仅基于肿瘤细胞的类型，还与微环境的结构和组成密切相关。

研究人员还通过比较原发性与复发性AGCT之间的细胞组成，发现复发性肿瘤中FOXL2+COL1A1+细胞的比例显著下降，而其他类型的成纤维细胞则没有明显变化。这可能意味着，复发性AGCT中FOXL2+COL1A1+细胞的减少与肿瘤进展和治疗反应有关。此外，免疫细胞的组成和分布也存在差异，复发性AGCT中M0 CD68+巨噬细胞和CD8+T细胞的比例显著增加，尤其是在胶原蛋白富集区域。这些发现可能为理解AGCT的复发机制提供线索，同时提示了免疫细胞和肿瘤细胞在微环境中的相互作用可能影响疾病进程。

在转录组分析方面，研究者发现AGCT-1和AGCT-2之间的差异远大于原发性与复发性肿瘤之间的差异。通过功能富集分析，研究团队确定了与细胞外基质（ECM）和胶原蛋白相关的基因集合在两种亚型之间存在显著差异，这可能表明AGCT的亚型特征与ECM的动态变化有关。例如，AGCT-1中与凝血、异源代谢、E2F和MYC靶点以及G2M检查点相关的基因集合更为丰富，而AGCT-2则显示出与上皮-间质转化（EMT）和炎症反应相关的基因集合。这些转录组特征可能反映了两种亚型在生物学行为上的不同，为未来的治疗靶点筛选提供了潜在的方向。

此外，研究者还通过比较不同AGCT亚型的免疫细胞分布和相互作用，发现AGCT-1中免疫细胞的相互作用频率高于AGCT-2。这可能意味着AGCT-1的微环境更倾向于促进免疫细胞的聚集，而AGCT-2的微环境则表现出较低的免疫细胞浸润。进一步分析显示，免疫细胞在胶原蛋白富集区域的分布存在显著差异，提示了胶原蛋白在调控免疫细胞行为中的潜在作用。

研究的局限性包括样本量较小以及使用ROI（感兴趣区域）而非全组织切片进行分析，这可能影响对肿瘤微环境的全面理解。此外，由于肿瘤的罕见性，难以获取高质量的配对原发性和复发性样本，这也限制了对微环境演变的深入分析。然而，这些发现仍然为AGCT的治疗策略提供了新的思路，特别是在结合微环境特征和分子特征的个性化治疗方面。

综上所述，这项研究通过成像质量分析技术揭示了AGCT微环境的结构和功能特征，定义了两种不同的亚型，并探讨了它们在转录组和免疫细胞组成上的差异。这些发现不仅加深了对AGCT生物学特性的理解，还为未来的精准治疗和生物标志物开发提供了理论基础。同时，研究也强调了微环境在肿瘤进展和治疗反应中的重要性，表明基于微环境的分型可能比传统的组织学分类更能反映肿瘤的分子异质性。未来的研究可以进一步探索这些亚型在治疗反应和预后中的意义，以及如何通过调节微环境来改善治疗效果。