PFOS通过诱导人颗粒细胞VEGFA分泌促进内皮血管生成的机制研究

《Toxicology》：Vascular endothelial growth factor-containing conditioned medium from PFOS-exposed human granulosa cells promotes endothelial angiogenesis in vitro

本研究揭示了全氟辛烷磺酸（PFOS）通过激活PI3K/AKT信号通路上调人颗粒细胞VEGFA表达，并促进其分泌。VEGFA通过旁分泌作用增强内皮细胞迁移和血管生成能力，为PFOS干扰卵巢血管重塑的生殖毒性机制提供了新见解。（字数：110字）

　　

¹研究亮点²

全局mRNA测序显示，暴露于10μM PFOS 48小时可上调六个基因的表达，其中包括血管内皮生长因子A（VEGFA）。在不同实验条件下，该基因均表现出显著诱导，在25μM PFOS处理6小时和12小时后达到峰值，且未观察到明显细胞毒性。

³PFOS对HGrC1细胞全局mRNA表达的影响⁴

为探究急性暴露条件下PFOS的潜在基因靶点，研究人员用两种浓度的PFOS处理HGrC1细胞48小时：15nM（相当于ART患者卵泡液中检测到的浓度）和10μM（相当于职业暴露人群的血清浓度）。通过alamarBlue?检测证实，较高浓度在48小时内不会引发细胞毒性。全局mRNA测序结果显示，10μM PFOS处理可显著上调六个基因的表达，其中最引人注目的是血管内皮生长因子A（VEGFA）。后续实验证实，25μM PFOS在6小时和12小时处理时能最大程度诱导VEGFA mRNA表达。

25μM PFOS可快速激活蛋白激酶B（AKT）和cAMP反应元件结合蛋白（CREB）。值得注意的是，当使用PI3K/AKT通路抑制剂处理后，PFOS对VEGFA mRNA的上调作用被完全阻断。虽然PFOS降低了细胞内的VEGFA蛋白水平，但却显著促进其向培养基中的分泌——这一过程不依赖于PI3K/AKT和蛋白激酶A（PKA）信号通路。

来自PFOS暴露的HGrC1细胞的条件培养基，不仅增强了HGrC1细胞自身的迁移能力，还显著促进了人内皮细胞EA.hy926的迁移和血管形成能力。通过免疫沉淀法去除条件培养基中的VEGFA后，血管形成参数恢复至对照组水平；而重新加入VEGFA则能恢复其促血管生成活性。这些结果明确表明VEGFA是PFOS诱导内皮细胞促血管生成效应的关键介质。

⁵讨论⁶

本研究首次在人类非黄素化颗粒细胞HGrC1中揭示了PFOS的作用机制。结果表明PFOS通过激活PI3K/AKT信号通路上调VEGFA mRNA表达，并促进VEGFA分泌。富含VEGFA的条件培养基能双向促进颗粒细胞和内皮细胞的迁移，并特异性诱导内皮细胞形成血管样结构。这些发现为理解PFOS干扰卵泡内通讯和血管重塑的生殖毒性机制提供了重要线索。

⁷结论⁸

本研究首次证实PFOS可通过激活PI3K/AKT通路诱导人颗粒细胞VEGFA表达。VEGFA以不依赖于PI3K/AKT和PKA的方式分泌后，能促进颗粒细胞迁移并刺激内皮细胞血管生成行为。这些数据表明PFOS可能通过破坏卵泡内通讯和血管重塑过程，进而损害卵泡发育和卵巢功能。