基于亮氨酸氨基肽酶激活的CDDO-Me/川芎嗪共前药协同治疗肝损伤的研究

《Bioorganic Chemistry》：Development of a leucine aminopeptidase-activatable co-prodrug from CDDO-Me and ligustrazine for synergistic treatment of liver injury

本研究设计并合成了一种可由亮氨酸氨基肽酶（LAP）特异性激活的共前药CHL，该前药由CDDO-Me（CM）与川芎嗪（HMP）偶联而成。在肝损伤模型中，CHL能高效释放>90%的活性药物，通过降低细胞内活性氧（ROS）、减轻线粒体损伤与抑制细胞凋亡发挥多重抗炎作用。尤为突出的是，CHL在CCl4诱导的急慢性肝损伤模型（体内外）中疗效显著优于母药联合疗法，并能强力激活Nrf2依赖性抗氧化基因（HO-1、NQO1）表达，同时抑制NF-κB转录活性（p-p65降低5倍），显示协同治疗肝损伤的巨大潜力。

　　

Section snippets

Chemistry

除非另有说明，所有商业试剂和溶剂均购自商业来源，无需进一步纯化即可使用。所有反应均通过硅胶板（SGF254）上的薄层色谱法（TLC）进行监测。使用硅胶（200-300目）通过柱色谱法纯化化合物，并使用高效液相色谱法（HPLC）检测目标化合物的纯度。¹H NMR和¹³C NMR谱图在Bruker Avance DRX-400光谱仪（德国布鲁克公司）上记录，并使用...

Synthesis of CHL

CHL的合成遵循方案1中概述的路线完成。首先，通过对氨基苄醇（1）与Boc-L-亮氨酸（Boc-L-Leu）在2-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯（HATU）和N,N-二异丙基乙胺（DIPEA）存在下进行酰化反应，制备酰胺中间体2。然后，中间体2用三溴化磷（PBr₃）处理得到溴化物3。同时，CDDO-Me（4）和川芎嗪（HMP，5）通过迈克尔加成反应转化为烯醇化合物6...

Conclusion

总之，我们设计并合成了一种LAP可识别的CM/HMP共前药CHL。体外研究表明，CHL能以LAP依赖性方式高效释放超过90%的CM和HMP，并具有高度特异性，在血清中可保持稳定长达8小时。这种酶触发系统能够在肝组织中实现位点特异性激活，并高效释放两种活性药物（>90%），从而产生协同的抗氧化和抗炎作用。与先前报道的基于氧化还原或一氧化氮（NO）响应的...