大孔树脂同步富集分离脱脂蛋 yolk 水解物中多种生物活性肽的创新工艺研究

本文开发了一种基于大孔树脂（MARs）的规模化分离技术，通过优化上样pH和乙醇梯度洗脱，成功从脱脂蛋 yolk 水解物（EYH）中同步富集了促骨生成（osteogenic）、金属螯合（metal-chelating）、抗氧化（TEAC = 675.63 μmol TE/g）和ACE抑制（IC50 = 0.26 mg/mL）等多类活性肽，为蛋 yolk 副产物的高值化利用提供了可行方案。

　　

Highlight

脱脂蛋 yolk 是蛋 yolk 磷脂提取过程中的副产品。本研究获得的脱脂蛋 yolk 水解物（EYH）展现出多重生物活性，包括促骨生成、金属螯合、抗氧化和ACE抑制活性。本研究旨在提供一种可放大的方法，利用大孔树脂从EYH中同步富集和分离不同的生物活性肽。静态吸附和解吸实验表明，DA201-C是最佳树脂。上样样品的pH值调节了富集效果，随后通过不同乙醇梯度洗脱分离出不同的生物活性肽。上样pH 7.5显示出最佳效果，总回收率达到87.65%（w/w，基于EYH）。W-1组分富集了促骨生成肽，具有促进MC3T3-E1细胞增殖和分化以及金属螯合活性；Ethl-20%组分富集了抗氧化肽（TEAC = 675.63 μmol TE/g）；Ethl-40%和Ethl-80%组分富集了ACE抑制肽（IC₅₀ = 0.26 mg/mL）。通过LC-MS/MS在W-1中鉴定出二十多种磷酸肽，这些肽有助于其促骨生成活性。本研究为从EYH中大规模富集和分离促骨生成、金属螯合、抗氧化和ACE抑制肽提供了一种简单有效的技术，有利于脱脂蛋 yolk 粉的充分利用。

结论 (Conclusion)

本研究提出了一种基于大孔树脂（MAR）的方法，用于从EYH中同步富集和分离不同的生物活性肽。使用DA201-C树脂和乙醇梯度洗脱，将EYH分离为四个组分——W-1、W-2、Ethl-20%和Ethl-80%。具有促骨生成和金属螯合活性的磷酸肽富集在W-1中，具有ABTS^•+自由基清除活性的抗氧化肽富集在Ethl-20%中，而ACE抑制肽则富集在Ethl-80%中。上样pH值是影响不同组分富集效果的关键因素。该方法简单、经济且易于放大，为从蛋白质水解物中工业化分离多种生物活性肽提供了有前景的策略。