佐剂化重组通用流感血凝素疫苗在老年雪貂中引发保护性免疫反应的研究

《Immunity & Ageing》：Elicitation of protective immune responses against influenza a viruses in elderly ferrets by adjuvanted recombinant universal influenza hemagglutinin vaccines

本研究针对老年人群对流感疫苗免疫应答弱、抗体滴度下降快的问题，开展了基于COBRA技术的通用流感血凝素疫苗与TLR激动剂佐剂（TRAC478和SAS）联合使用的研究。结果表明，佐剂化疫苗能显著提高老年雪貂的HAI抗体滴度和中和活性，有效减轻病毒感染后的临床症状和病毒载量，为开发适合老年人的长效广谱流感疫苗提供了新策略。

　　

流感病毒一直是威胁全球公共卫生的重要病原体，尤其对老年人群造成沉重负担。随着年龄增长，免疫系统功能逐渐衰退，这一现象被称为免疫衰老（immunosenescence），导致老年人对疫苗的应答能力显著下降。虽然目前推荐老年人接种高剂量或MF-59佐化的流感疫苗，但产生的抗体滴度往往在接种后6个月内迅速下降，到下一个流感季节时已基本回落至基线水平。这种免疫保护的短暂性使得老年人每个流感季节都面临较高的感染风险。

更令人担忧的是，当前流感疫苗主要针对血凝素（Hemagglutinin, HA）蛋白，而老年人由于免疫记忆库的限制，很难对新抗原产生有效的B细胞应答。因此，开发能够诱导广泛、持久保护性免疫的新一代流感疫苗成为当务之急。发表在《Immunity & Ageing》的最新研究中，Zhang等科学家探索了一种创新解决方案：将计算优化的广谱反应抗原（COBRA）技术与新型佐剂系统相结合，专门针对老年群体的特殊免疫需求开展研究。

研究人员选择老年雪貂作为实验模型，这种动物在3-4岁时开始出现老年性疾病，其免疫系统的变化与人类老年人有很好的可比性。研究中使用的雪貂年龄在56-74个月之间，相当于人类的高龄阶段。这些雪貂事先感染过历史流感病毒株，模拟了老年人群体内存在预存免疫状态的实际情况。

研究团队采用了几个关键技术方法：首先利用COBRA方法设计广谱HA抗原（Y2和NG2）；其次使用两种新型佐剂系统TRAC478（含TLR4和TLR7/8激动剂）和SAS（含TLR4激动剂和皂苷）；通过ELISA、HAI和微中和试验评估抗体应答；最后用H1N1病毒进行攻毒实验，监测体重变化、临床症状和病毒载量等指标。

疫苗接种老年雪貂HA疫苗联合佐剂引发强劲保护性抗体应答

血清学分析显示，单独使用COBRA HA蛋白疫苗的老年雪貂仅产生低水平或检测不到的HAI抗体。而添加TRAC478或SAS佐剂后，针对2009-2019年分离的H1N1病毒，HAI滴度显著提高，达到40（5.32 Log₂）以上。加强免疫后，TRAC478组对H1N1病毒的HAI滴度进一步升高至80（6.32 Log₂）以上，表现出更优的免疫增强效果。

针对H3N2病毒，佐剂化疫苗也显示出更好的免疫原性，尤其是TRAC478佐剂组对测试的8个H3N2毒株中的6个产生了有效抑制。ELISA检测发现，佐剂化疫苗组的总IgG抗体滴度比无佐剂组高4-10倍，证实了佐剂在增强体液免疫应答中的关键作用。

这项研究的讨论部分强调了在老年群体中实现有效免疫保护的双重策略价值：一方面，COBRA技术提供的广谱抗原能够覆盖多个流感病毒株；另一方面，新型佐剂系统通过激活Toll样受体（Toll-like receptor, TLR）通路，有效克服了年龄相关的免疫应答缺陷。

与传统的MF-59佐剂主要诱导Th2型免疫应答不同，TRAC478和SAS佐剂能够促进更平衡的Th1/Th2应答，这可能有助于建立更长久的免疫记忆。特别是在老年个体胸腺萎缩、初始T细胞产生减少的情况下，通过佐剂增强现有免疫细胞的活化能力显得尤为重要。

研究还发现H1 HA抗原比H3 HA抗原具有更强的免疫原性，这解释了为什么在所有实验组中，对H1N1病毒的抗体应答普遍优于H3N2病毒。作者建议未来研究可考虑增加H3 HA组分的数量或优化其设计，以改善对H3N2病毒的保护效果。

综上所述，这项研究证明了COBRA HA蛋白与TLR激动剂佐剂联合使用能够在老年雪貂中诱导高质量的保护性免疫应答，不仅显著提高抗体滴度，还能有效控制病毒感染后的病毒复制和疾病进展。这种疫苗策略为解决老年人流感疫苗接种面临的挑战提供了新的思路，特别是针对免疫系统功能减弱的群体，展示了一条实现更广泛、更持久保护的有效途径。