通过具有“严格特异性标准”的抗体，揭示了小鼠脑组织中神经肽Y Y1受体的定位情况

《Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology》：Neuropeptide Y Y1 receptor localization in mouse brain tissue revealed by an antibody with “hard specificity criterion”

本研究利用特异性验证的Y1受体抗体，发现内源性Y1受体在小鼠脑组织中以胞内点状结构存在，并与Y5受体共定位。结果表明，开发针对生理活性形式的GPCR抗体具有挑战性，但对理解其在体内的功能至关重要。

　　

摘要

已在敲除动物中测试了抗G蛋白偶联受体（GPCR）抗体的特异性；其中许多抗体具有非特异性（Pradidarcheep等人，2009年）。由于缺乏针对GPCR蛋白的特异性抗体，内源性GPCR蛋白在其天然状态下的组织分布和亚细胞定位在很大程度上仍不清楚。抗神经肽Y Y₅受体抗体并未与Y₅敲除脑组织发生反应，但在野生型脑组织中发现了位于质膜附近的Y₅免疫反应活性，表现为点状结构（Murase等人，2017年）。在这里，我们使用抗Y₁抗体检测了内源性神经肽Y Y₁受体的表达模式，并通过Y₁敲除小鼠验证了该抗体的特异性。抗Y₁抗体与野生型脑切片发生反应并检测到了Y₁免疫反应活性。在所检测的大多数脑区域中观察到了同时表达Y₁和Y₅的神经元。在这些神经元中，Y₁和Y₅的免疫反应活性均表现为点状结构。抗Y₁抗体识别的是内源性Y₁分子的细胞内部分，而不是与细胞膜结合的形式，这表明在体内制备针对Y₁分子生理活性形式的抗体存在困难且具有挑战性。