酸枣仁通过BMAL1介导的时钟自噬调控cAMP通路昼夜节律改善抑郁相关睡眠障碍

《Phytomedicine》：Semen Ziziphi Spinosae affects circadian rhythm of the cAMP signaling pathway by BMAL1-clockophagy to improve sleep disorders in depression

本研究揭示了酸枣仁（SZS）通过直接结合生物钟核心蛋白BMAL1，调控其介导的时钟自噬（clockophagy）昼夜节律，进而影响下游环磷腺苷（cAMP）信号通路（涉及PAK1、p-PAK1、CREB、p-CREB等关键分子）的周期性波动，最终改善慢性不可预知温和应激（CUMS）和睡眠剥夺（SD）模型小鼠的抑郁样行为及睡眠结构（包括NREMS、REMS时长及睡眠潜伏期等）。该发现为中医药治疗抑郁相关睡眠障碍提供了新的分子机制见解。

　　

Highlight

试剂

用于蛋白质印迹（WB）、免疫组织化学和免疫荧光的抗体如下：LC3 (14600-1-AP-50UL, Proteintech, 中国)，p21激活激酶1 (PAK1)/PAK2/PAK3 (BS78122, Bioworld, 中国)；磷酸化PAK1/2/3 (P-PAK 1/2/3) (BS40118, Bioworld, 中国)，GAPDH (GB11002-100, Servicebio)，磷酸化PAK1ACTIN (GB11002-100, Servicebio)，BMAL1 (1:2000, PA1-46118, Thermo Fisher)，山羊抗兔HRP二抗 (1:5000, SA00001-2, proteintech)，CY3标记山羊抗兔IgG。

SZS调节抑郁小鼠的抑郁样行为、睡眠时长和5-HT的昼夜节律

为了全面评估SZS对抑郁小鼠的睡眠调节作用，我们采用了多种实验方法，例如强迫游泳实验（FST）、悬尾实验（TST）、旷场实验（OFT）、蔗糖偏好实验（SPT），以及睡眠时长和睡眠潜伏期的测量，还有5-羟色胺（5-HT）昼夜节律的评估。结果表明，CUMS刺激导致OFT中的总移动距离和平均速度显著下降。此外，它还引起SPT中蔗糖偏好率的降低。

讨论

睡眠障碍是抑郁普遍存在的共病症状，通常表现为失眠、睡眠浅、多梦和早醒。酸枣仁（SZS）是鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子，在中医中用于治疗各种睡眠障碍有着悠久的历史。动物研究表明，以SZS为君药的经典方剂酸枣仁汤...

结论

在本研究中，我们通过应用CUMS、SD和雷帕霉素处理，成功建立了抑郁相关睡眠障碍的体内和体外模型。随后，我们使用SZS和含SZS的药物血清进行了干预。通过对BMAL1调控的时钟自噬和cAMP信号通路昼夜节律变化的全面检测，我们得出了一个结论性的发现：SZS通过...发挥其治疗作用。

CRediT作者贡献声明

Yi Zhang:写作 – 原稿，验证。 Yewen Feng:写作 – 原稿，方法论。 Yulin Lu:写作 – 原稿，可视化。 Yanxin Ying:写作 – 审阅。 Di Wang:形式分析。 Xiangchang Ying:写作 – 原稿。 Zixin Pang:验证。 Wenxuan Zhang:方法论。 Zhuohui Liu:可视化。 Wanqian Zheng:方法论。 Fan Yang:数据管理。 Qiongqiong Xu:方法论。 Shuting Chen:形式分析。 Yimin Zhu:数据管理。 Jiayi Yu:...