miR-196a-5p通过靶向LIFR调控EMT促进食管鳞癌恶性进展的机制研究

《Cancer Cell International》：miR-196a-5p promotes the proliferation, migration, and invasion of esophageal squamous cell carcinoma by targeting LIFR

本研究针对食管鳞癌（ESCC）中miR-196a-5p的促癌机制展开深入探索，通过体外细胞实验和体内动物模型证实miR-196a-5p可通过靶向白血病抑制因子受体（LIFR）促进ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化（EMT）过程。该发现不仅揭示了miR-196a-5p/LIFR轴在ESCC中的关键作用，更为ESCC的诊断生物标志物开发和靶向治疗策略提供了新的理论依据。

　　

在全球范围内，食管癌一直是威胁人类健康的重大疾病，其中食管鳞状细胞癌（ESCC）作为主要亚型，尤其具有侵袭性强、预后差的特点。尽管近年来治疗手段有所进步，但ESCC患者的五年生存率仍徘徊在15%-20%之间，中位总生存期仅10-12个月。这背后隐藏的分子机制复杂且尚未完全阐明，尤其是表观遗传调控在ESCC发生发展中的作用亟需深入探索。MicroRNA（miRNA）作为一类内源性非编码小RNA，能在转录后水平调控基因表达，已成为癌症研究的热点。其中，miR-196a-5p在多种癌症中表现出双重角色，既可促进肿瘤发展，也可能抑制肿瘤进程，但它在ESCC中的具体功能及机制仍不明确。与此同时，白血病抑制因子受体（LIFR）作为多种细胞因子的受体，在不同癌症中发挥的作用各异，其在ESCC中的表达模式及生物学意义也有待揭示。在这一背景下，张军和等研究人员在《Cancer Cell International》上发表了题为“miR-196a-5p promotes the proliferation, migration, and invasion of esophageal squamous cell carcinoma by targeting LIFR”的研究论文，系统探讨了miR-196a-5p通过调控LIFR影响ESCC恶性表型的分子机制。

为开展本研究，作者运用了生物信息学分析（ENCORI/starBase数据库）、细胞功能实验（CCK-8、细胞划痕、Transwell小室实验）、蛋白印迹（Western blot）、双荧光素酶报告基因检测、裸鼠异种移植瘤模型以及免疫组织化学染色等关键技术方法，其中临床样本数据来源于公共数据库的162例食管癌组织与11例正常组织。

miR-196a-5p在食管癌组织中表达上调且与预后不良相关

通过ENCORI/starBase数据库分析发现，miR-196a-5p在食管癌组织（n=162）中的表达显著高于正常组织（n=11）。Kaplan-Meier生存分析进一步显示，miR-196a-5p高表达患者的总生存期明显缩短，提示其可能作为ESCC的不良预后指标。

过表达miR-196a-5p促进ESCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT进程

在EC-109、ECA-109和KYSE-150等ESCC细胞系中过表达miR-196a-5p后，CCK-8实验显示细胞增殖能力增强；划痕实验和Transwell实验结果表明细胞迁移和侵袭能力显著提升。Western blot分析发现上皮标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达下降，间质标志物N-钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达上升，说明miR-196a-5p可促进EMT进程。

抑制miR-196a-5p可逆转ESCC细胞的恶性表型

使用miR-196a-5p抑制剂处理后，ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到抑制，E-cadherin表达回升，N-cadherin与Vimentin表达下降，表明抑制miR-196a-5p能有效延缓ESCC的恶性进展。

LIFR是miR-196a-5p的直接靶基因

生物信息学预测结合双荧光素酶报告基因实验证实，miR-196a-5p可直接结合LIFR的3'非翻译区（3' UTR），负调控其表达。Western blot结果进一步显示，过表达miR-196a-5p会降低LIFR蛋白水平，而抑制miR-196a-5p则能上调LIFR表达。

LIFR过表达可挽救miR-196a-5p促癌效应

在过表达miR-196a-5p的ESCC细胞中进一步过表达LIFR，发现其增殖、迁移、侵袭能力受到抑制，EMT相关蛋白表达趋势发生逆转。这说明LIFR作为miR-196a-5p的下游效应分子，介导了其在ESCC中的促癌功能。

体内实验验证miR-196a-5p的促瘤作用

通过裸鼠移植瘤模型发现，过表达miR-196a-5p能显著促进肿瘤生长。免疫组化结果显示，miR-196a-5p高表达组中LIFR和E-cadherin表达下降，Vimentin与增殖标志物Ki67表达上升，与体外实验结果一致。

本研究系统阐明了miR-196a-5p通过直接靶向LIFR促进ESCC增殖、迁移、侵袭及EMT过程的分子机制。不仅证实了miR-196a-5p在ESCC中的致癌作用，也首次揭示LIFR在该癌种中可能扮演抑癌基因的角色。这些发现为ESCC的早期诊断提供了新的潜在生物标志物，也为针对miR-196a-5p/LIFR轴的靶向治疗策略开发奠定了实验基础。尽管研究在样本量和下游通路探讨方面存在一定局限，但其整体设计严谨、证据链完整，对深化理解ESCC发病机制具有重要科学意义。