从黄连（Coptis chinensis Franch）中提取的总生物碱通过同时调节小鼠体内的AMPK/SREBP-1c和PPARα/LXRα通路，改善高脂血症和肝脂肪变性

《Frontiers in Pharmacology》：Total alkaloids from Coptis chinensis Franch ameliorate hyperlipidemia and hepatic steatosis via dual pathway modulation of AMPK/SREBP-1c and PPARα/LXRα in mice

高脂血症相关非酒精性脂肪肝小鼠模型中，Coptis chinensis总生物碱（TAC）通过激活AMPK抑制SREBP-1c核转位及HMGCR表达，同时上调PPARα/LXRα通路促进LPL/HL脂解酶活性，显著改善血脂代谢、肝功能及病理损伤。

　　随着全球生活水平的提升，血脂异常及其引发的非酒精性脂肪肝病（NAFLD）已成为国际关注的重要健康问题。血脂异常通常表现为血液中胆固醇和甘油三酯水平的异常升高，这种代谢紊乱与多种健康问题密切相关，尤其是NAFLD和心血管-脑血管疾病。NAFLD是一种常见的慢性肝脏疾病，其特征是在缺乏显著酒精摄入的情况下，肝脏内脂肪过度堆积。研究显示，血脂异常是NAFLD的重要风险因素，它会引发肝脏脂质代谢的失调，进而导致脂肪在肝脏中的异常沉积。同时，血脂异常也与心血管疾病的发生密切相关，尤其是低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的升高，被认为是动脉粥样硬化的关键诱因，而动脉粥样硬化是心血管疾病的病理基础。

为了探索新的治疗策略，研究者们开始关注传统中药中的活性成分。其中，黄连（*Coptis chinensis* Franch）的总生物碱（TAC）因其调节血脂和改善脂肪肝的潜力而受到广泛关注。近年来，研究发现黄连的主要活性成分——小檗碱（BBR）在调节血脂水平和改善NAFLD方面表现出显著的疗效。BBR通过多种机制发挥作用，包括直接靶向AKR1B10蛋白，从而改善肝脏脂肪沉积、胰岛素抵抗和甘油三酯代谢平衡。此外，BBR还通过增强KLF16与PPARα的相互作用，发挥抗炎和抗氧化作用，从而降低心血管事件的风险。这些研究结果表明，小檗碱在治疗代谢性疾病和心血管疾病方面具有多靶点的药理特性，显示出广阔的临床应用前景。

然而，尽管已有大量关于小檗碱的研究，其作为总生物碱（TAC）在血脂异常与脂肪肝共存状态下的疗效及其分子机制仍不完全清楚。因此，本研究旨在建立一个血脂异常合并脂肪肝的小鼠模型，评估TAC对小鼠体重、肝功能和病理变化的影响，并进一步探讨其在治疗血脂异常与脂肪肝中的潜在机制。通过系统性地分析代谢参数、血清脂质谱、肝功能指标和组织病理学变化，本研究旨在为TAC在相关疾病中的临床应用提供科学依据。

在实验材料方面，本研究使用了SPF级5周龄雄性C57BL/6小鼠，其体重约为30克。TAC是从广州康城生物科技有限公司获得的标准化植物提取物，其总生物碱含量经高效液相色谱（HPLC）检测确认为≥98%。主要的生物碱成分包括小檗碱（约75%）、黄连碱（约10%）、掌叶防己碱（约6%）和药根碱（约3%）。实验中还使用了商业化的试剂盒，用于检测总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肝脂酶（HL）、脂蛋白脂肪酶（LPL）和HMG-CoA还原酶（HMGCR）等指标。此外，还使用了辛伐他汀作为阳性对照药物。

为了建立血脂异常合并脂肪肝的模型，实验将小鼠随机分为六组（每组9只）：正常对照组、模型对照组、TAC高剂量组、中剂量组、低剂量组以及辛伐他汀阳性对照组。在适应期后，除正常对照组外，其余五组均接受高脂饮食（HFD）。HFD的配方为60%的热量来自脂肪（主要为猪油），20%来自碳水化合物，20%来自蛋白质，同时添加1.25%的胆固醇和0.5%的钠胆酸，以加速血脂异常和脂肪肝的发展。该饮食结构模拟了人类饮食中高能量、高脂肪和高胆固醇的摄入模式，符合西方饮食的特点。小鼠在该饮食下饲养6周，其中前4周用于模型建立，后2周用于药物干预。在此期间，每4天监测小鼠的体重和血糖水平。

实验结果显示，与正常组相比，模型对照组的小鼠体重、肝脏湿重和肝指数显著升高，同时血糖水平也明显上升，表明该模型成功建立了血脂异常合并脂肪肝的病理特征。相比之下，辛伐他汀组和不同剂量的TAC组均表现出这些指标的显著下降（*P < 0.05），并且TAC的疗效呈现出剂量依赖性，说明其对血脂异常合并脂肪肝具有一定的治疗潜力。值得注意的是，TAC高剂量组的肝脏湿重显著低于辛伐他汀组（*P < 0.05），提示TAC在降低肝脏脂肪沉积方面可能具有更优的效果。

为了进一步评估TAC对血脂水平和肝功能的影响，实验检测了血清中的TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。结果显示，HFD显著增加了TC、TG和LDL-C水平，同时降低了HDL-C水平。TAC干预后，所有剂量组均表现出这些指标的显著改善，尤其是高剂量组，其效果与辛伐他汀相当，甚至更优。此外，TAC显著降低了ALT和AST水平，这表明其对肝功能具有改善作用，可能通过抗氧化和抗炎机制实现。这些结果进一步支持了TAC在调节血脂异常和改善脂肪肝中的潜力。

在分子机制方面，研究通过qPCR和Western blot分析了TAC对关键脂质代谢基因和蛋白表达的影响。结果表明，TAC显著降低了HMGCR和SREBP-1c的表达水平，尤其是核内的SREBP-1c，同时显著增加了AMPK的磷酸化水平。这些变化表明，TAC可能通过激活AMPK来抑制SREBP-1c的核转位，从而减少脂质合成。进一步研究发现，当使用AMPK特异性抑制剂Compound C阻断该通路时，TAC的保护作用被完全逆转，说明其疗效依赖于AMPK的激活。这为TAC通过AMPK-SREBP-1c通路调节血脂代谢提供了有力证据。

在脂质分解相关基因的调控方面，TAC显著提高了LPL和HL的表达水平，同时上调了PPARα和LXRα的表达。PPARα和LXRα是脂质分解和代谢的关键调节因子，它们的激活有助于促进脂肪分解和胆固醇代谢，从而降低血脂水平。此外，当使用PPARα特异性抑制剂GW6471阻断该通路时，TAC的疗效也被显著逆转，进一步验证了其通过PPARα/LXRα轴调节脂质分解的作用机制。这些结果表明，TAC通过双通路调节机制——抑制脂质合成并促进脂质分解——来改善血脂异常和脂肪肝。

在讨论部分，研究强调了肝脏在脂质代谢中的核心作用，以及肝脏脂肪沉积对代谢紊乱的深远影响。TAC的干预不仅改善了血脂水平，还显著降低了ALT和AST水平，表明其对肝功能的保护作用。此外，TAC对HMGCR和SREBP-1c的抑制作用，为减少脂质合成提供了分子基础。同时，TAC对LPL和HL的促进作用，则有助于脂质的分解和清除。这些结果与之前关于小檗碱的研究一致，显示其在调节脂质代谢和减轻肝脏损伤方面的有效性。

研究还指出，尽管TAC的双通路调节机制得到了初步验证，但其潜在的多组分协同作用仍需进一步探索。TAC包含多种生物碱成分，如小檗碱、黄连碱、掌叶防己碱和药根碱，这些成分可能通过不同的靶点共同发挥作用。这种多靶点协同效应可能使得TAC在治疗复杂代谢紊乱方面比单一成分（如小檗碱）更具优势。然而，当前研究也存在一些局限性，例如未探讨TAC对肠道微生物群与脂质代谢之间的关系，以及其长期使用可能带来的毒性效应。

综上所述，TAC通过双重机制——抑制脂质合成和促进脂质分解——在改善血脂异常和脂肪肝方面表现出显著的疗效。这种多通路调节机制为TAC在治疗代谢性疾病和心血管疾病中的应用提供了理论依据。未来的研究应结合代谢组学和宏基因组学技术，深入解析TAC的多靶点作用网络，并开展长期毒性研究，以促进其临床转化。此外，探索TAC对肠道微生物群的影响，以及其对脂质代谢相关基因的调控，也将为理解其治疗效果提供更全面的视角。