华氏润燥汤治疗原发性干燥综合征的疗效：一项双盲、随机对照试验，并结合m6A和m5C RNA修饰分析

《Frontiers in Pharmacology》：Huashi Runzao decoction for primary Sj?gren disease: a double-blind, randomized controlled trial combined with m6A and m5C RNA modification analysis

HRD通过调节m6A/m5C甲基化及HNRNPA2B1基因改善pSD患者唾液流量、症状评分和疾病活动度，临床试验显示其安全有效。

　　这项研究围绕着“华实润燥汤”（HRD）在原发性干燥综合征（pSD）治疗中的作用展开，通过一项双盲、随机、安慰剂对照的临床试验，评估了HRD对pSD患者的疗效与安全性，并进一步探索了其在pSD中的表观遗传机制。干燥综合征是一种以自身免疫反应导致外分泌腺功能障碍为主要特征的慢性疾病，常见症状包括口干、眼干、疲劳、四肢疼痛等，严重时甚至可能引发多系统受累，如血小板减少和间质性肺病，影响患者的生活质量与预后。尽管目前已有多种药物用于治疗该病，但其疗效有限，且存在一定的副作用。因此，寻找新的治疗方案具有重要意义。

HRD是一种基于传统中医理论配伍而成的中药复方，由六味药材组成，其配方来源于“百合地黄汤”与“保和丸”的结合，并进行了相应的调整。该复方已在中国获得国家发明专利，并在临床实践中显示出一定的疗效。然而，由于缺乏高质量的随机对照试验（RCT）支持，其确切疗效与作用机制尚未被充分证实。本研究正是为了填补这一空白，通过严格的RCT设计，验证HRD对pSD患者的治疗效果，并探讨其可能的表观遗传学作用机制。

在方法学方面，研究采用了单中心、随机、双盲、安慰剂对照的临床试验设计，确保了实验结果的客观性和科学性。参与者来自中国日本友好医院，纳入标准包括年龄在18至75岁之间、符合2016年ACR/EULAR的pSD诊断标准、具备特定的自身抗体阳性或免疫指标异常等。排除标准则包括合并其他结缔组织病、近三个月内使用过糖皮质激素或生物免疫抑制剂、妊娠或哺乳期、严重的精神或神经系统疾病、器官功能严重受损等。研究共纳入118名患者，其中HRD组和安慰剂组各59人，最终有111人完成主要分析。

在干预措施方面，HRD组与安慰剂组均接受相同的辅助药物——羟氯喹硫酸盐，但HRD组接受的是HRD中药方剂，而安慰剂组则接受模拟剂。HRD的制备过程包括冷水浸泡、两次加热提取以及均分服用。为了保证实验的双盲性，所有药物均以相同的形式进行包装，并由独立人员分配编号，确保患者、医生及研究人员无法识别药物的真实组别。此外，所有参与者的血样均在基线和治疗后采集，用于分析RNA甲基化水平及调控因子表达。

研究结果显示，HRD在改善外分泌腺功能方面表现出显著效果。具体而言，治疗12周后，HRD组患者的唾液分泌量较基线显著增加（P = 0.049），而泪液分泌量则显著提升（P = 0.005）。此外，HRD还显著改善了患者的主观症状，包括口干（P < 0.001）、眼干（P = 0.004）、全身干燥（P = 0.001）以及四肢疼痛（P = 0.008），并且ESSPRI评分显著提高（P = 0.001）。在疾病活动度方面，HRD组的ClinESSDAI评分较基线显著下降（P = 0.038），表明其在控制疾病进展方面具有潜力。同时，HRD还提升了患者的生活质量评分，尤其是在情感功能、身体疼痛、整体健康和健康变化等方面，显示出其对多维度健康指标的改善作用。

在安全性方面，研究记录了所有参与者在治疗期间的不良反应。共11名患者出现不良事件，其中3名来自HRD组，8名来自安慰剂组。HRD组的不良反应主要包括腹泻和恶心呕吐，而安慰剂组则出现类似的不良反应，包括腹泻、恶心和皮疹。所有不良事件均自发缓解，且与治疗药物无明显关联。两组之间的不良反应发生率没有显著差异，表明HRD在安全性和耐受性方面与安慰剂相当。

为了进一步探讨HRD的作用机制，研究团队分析了外周血单个核细胞（PBMCs）中的RNA甲基化水平。结果显示，HRD组患者的m6A（N6-甲基腺苷）水平较基线有所上升，而m5C（5-甲基胞嘧啶）水平则下降。相比之下，安慰剂组在治疗后并未出现类似的改变。这一发现表明，HRD可能通过调控m6A和m5C这两种常见的RNA甲基化形式，影响pSD的病理生理过程。进一步的分析发现，HNRNPA2B1（一种RNA结合蛋白）可能是HRD作用的关键调控因子。HNRNPA2B1在HRD治疗后表达水平下降，而在安慰剂组则有所上升，提示其在调节免疫反应中可能发挥重要作用。

此外，研究团队还通过GO富集分析，发现HNRNPA2B1的靶基因主要与细胞凋亡、外分泌腺发育等过程相关，这与pSD的病理特征相符。同时，Spearman相关性分析显示，HNRNPA2B1的表达水平与患者血清中的类风湿因子（RF）水平呈显著正相关（r = 0.975，P < 0.01），提示HNRNPA2B1可能通过调控免疫反应，影响pSD的病情发展。这些结果不仅揭示了HRD的潜在作用机制，还为开发新的治疗策略提供了理论依据。

从研究的局限性来看，尽管HRD显示出一定的疗效，但本研究样本量较小，且仅在单一中心进行，因此其结论的普遍适用性受到一定限制。此外，研究仅分析了两种RNA甲基化形式，未来的研究应进一步探索其他类型的RNA修饰，以更全面地了解HRD的表观遗传学作用。同时，由于本研究排除了与其他自身免疫性疾病相关的患者，因此在将研究结果推广到更广泛的患者群体时需谨慎。

综上所述，HRD在改善pSD患者的外分泌腺功能、缓解主观症状以及降低疾病活动度方面表现出良好的疗效，同时其通过调控HNRNPA2B1，改变m6A和m5C的水平，可能在表观遗传层面发挥治疗作用。尽管研究结果具有一定的参考价值，但为了进一步验证其疗效和机制，未来仍需进行更大规模、多中心的临床试验，并结合更多类型的RNA修饰研究。这一研究不仅为pSD的治疗提供了新的思路，也为中医药在现代医学中的应用提供了科学支持。