针对淀粉样蛋白毒性：新型胆碱酯酶抑制剂保护海马细胞免受淀粉样肽引起的死亡

《Neurochemical Research》：Targeting Amyloid Toxicity: Novel Cholinesterase Inhibitors Protect Hippocampal Cells from Amyloid Peptide-Derived Death

阿尔茨海默病AChE抑制剂TVA、TVS、TVV通过抑制或构象变化在低浓度（<10?2 mg/ml）显著缓解Aβ25–35诱导的神经元损伤，高浓度则具毒性

　　

摘要

阿尔茨海默病（AD）是最常见的神经退行性疾病之一。大脑中β-淀粉样蛋白（Aβ）的积累被认为是该疾病的主要原因。乙酰胆碱酯酶（AChE）在AD的发病机制中起着独特的作用：(1) 其过度活跃会降低乙酰胆碱（ACh）的水平，导致胆碱能系统的退化；(2) 它始终与淀粉样蛋白沉积物共存，在那里可能促进淀粉样纤维的形成。AChE与Aβ结合，从而促进了纤维的组装以及由此产生的神经毒性。人们普遍认为，抑制AChE活性或阻止其与酶结合的化合物可以作为治疗AD的有效药物。最近开发了一类新的AChE抑制剂——N-取代氨基酸二烷基氨基烷基酰胺。在这项研究中，我们使用经Aβ25–35处理的大鼠海马神经元培养模型，评估了三种新型胆碱酯酶（ChE）抑制剂的神经保护作用：TVA（N-苯甲酰-DL-缬氨酸-二甲基氨基乙胺碘甲酸盐）、TVS（1-二乙氨基乙基-2-苯基-4-苯亚甲基-5-咪唑酮）和TVV（2-苯基-4-(对甲苯磺酰氧基苯亚甲基)-5-咪唑酮）。我们研究了这些化合物的浓度依赖性效应。所得的剂量-反应曲线分为两个明显阶段：较低浓度（< 10?2 mg/ml）表现出抗淀粉样蛋白或治疗活性，而较高浓度（> 10?2 mg/ml）对海马神经元具有毒性。这些有益效果通过多种检测方法得到了验证，包括LDH活性、乳酸含量、甲酚紫染色、Calcein AM/PI双染色和NF/GFAP免疫染色。TVA和TVV在10?2 mg/ml浓度下能有效减轻Aβ25–35（20 μg/ml）引起的神经元损伤。我们的研究结果表明，新合成的N-取代氨基酸二烷基氨基烷基酰胺家族成员——尤其是TVA和TVV——对Aβ25–35引起的大鼠海马神经元毒性具有很强的保护作用。它们与AChE的相互作用，无论是通过抑制酶活性还是导致酶构象变化，都被认为是其神经保护作用的主要机制。