芪仙通络方通过纤维蛋白原介导的BMPRI/ID3信号轴促进缺血性卒中后神经干细胞定向分化为神经元

《Orphanet Journal of Rare Diseases》：Qixian Tongluo Formula promotes the directional differentiation of neural stem cells into neurons via fibrinogen-mediated BMPRI/ID3 signal axis after ischemic stroke

本研究针对缺血性卒中后神经功能修复难题，探讨传统中药芪仙通络方（QXTLF）调控神经干细胞（NSCs）定向分化的机制。通过体内外实验证实，QXTLF通过抑制纤维蛋白原（Fg）沉积，调控BMPRI/ID3信号轴，促进NSCs向神经元分化，并改善脑梗死体积和神经功能缺损。该研究为缺血性卒中提供了新的治疗靶点和中药作用机制证据。

　　

脑卒中作为全球致残和致死的主要脑血管疾病，其中缺血性卒中占比高达80%。患者常遗留运动、认知等神经功能缺损，其核心病理机制涉及缺血/再灌注损伤引发的氧化应激、神经炎症及细胞凋亡级联反应。近年来，神经发生被证实是大脑自我修复的关键过程，而神经干细胞（NSCs）在其中的作用尤为突出。然而，缺血后微环境中NSCs的分化方向调控机制尚未明确，尤其是如何促进其向功能性神经元而非胶质细胞分化，成为治疗策略突破的难点。

传统中药芪仙通络方（QXTLF）由黄芪、仙灵脾、丹参等组成，临床用于脑梗死治疗显示疗效，但其调控NSCs分化的分子机制仍有待揭示。本研究通过大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型和低糖低氧（LGO）诱导的NSCs模型，模拟缺血后微环境，发现QXTLF能剂量依赖性地缩小脑梗死体积、改善神经功能评分，并促进海马区NSCs向神经元定向分化。进一步机制研究表明，QXTLF通过抑制纤维蛋白原（Fg）介导的BMPRI/ID3信号轴，逆转LGO诱导的NSCs分化失衡。该成果发表于《Orphanet Journal of Rare Diseases》，为缺血性卒中神经修复提供了新的理论依据和治疗策略。

研究关键技术方法包括：建立MCAO大鼠模型和LGO诱导的NSCs损伤模型，通过免疫荧光和Western blot检测细胞分化标志物（DCX、MAP-2、GFAP）及信号通路蛋白（BMPRI、p-Smad1/5/8、ID3），采用ELISA定量Fg含量，并利用BMPRI抑制剂LDN193189验证通路功能。

QXTLF减轻MCAO大鼠脑梗死并促进NSCs向神经元定向分化

通过TTC染色和改良神经严重程度评分（mNSS）发现，QXTLF治疗组大鼠脑梗死体积显著缩小，神经功能改善。免疫荧光显示，QXTLF增加海马区BrdU⁺增殖细胞、DCX⁺未成熟神经元和MAP-2⁺成熟神经元数量，同时减少GFAP⁺星形胶质细胞，表明其促进NSCs向神经元定向分化。

NSCs的鉴定与分化能力验证

从孕鼠海马分离的NSCs形成神经球，高表达Sox2和Nestin，且可分化为DCX⁺、MAP-2⁺神经元及GFAP⁺星形胶质细胞，证实模型可靠性。

QXTLF促进LGO诱导的NSCs向神经元分化

在LGO模型中，QXTLF含药血清剂量依赖性地增加DCX⁺和MAP-2⁺细胞比例，降低GFAP⁺细胞，Western blot结果一致，说明QXTLF直接调控NSCs分化方向。

QXTLF通过抑制Fg沉积调控NSCs分化

外源性Fg（2.5 mg/mL）逆转了QXTLF对DCX、MAP-2的上调作用及对GFAP的抑制作用，ELISA显示QXTLF降低LGO诱导的Fg含量，表明Fg沉积是QXTLF作用的关键环节。

QXTLF通过Fg-BMPRI/ID3信号轴调控分化

LGO激活BMPRI/p-Smad1/5/8/ID3通路，而QXTLF抑制该通路表达。使用LDN193189抑制BMPRI后，Fg的干扰作用被逆转，神经元分化标志物表达回升，证实BMPRI/ID3是Fg下游的关键信号轴。

研究结论指出，QXTLF通过抑制Fg沉积及BMPRI/ID3信号通路，重塑缺血后微环境，引导NSCs向神经元定向分化。该发现不仅深化了对中药多靶点作用机制的理解，也为卒中后神经再生提供了新的治疗策略，凸显传统药物在罕见神经系统疾病治疗中的潜力。