基于HPTLC和GC-MS分析的I?rīfal ?aghīr（小伊特利法）乙醇提取物植物化学指纹图谱研究：标准化与质量控制

《Results in Chemistry》：Phytochemical fingerprinting of ethanolic extract of I?rīfal ?aghīr – An unani formulation: standardization, HPTLC and GC–MS based analysis

本研究针对传统乌纳尼（Unani）复方制剂I?rīfal ?aghīr缺乏标准化质量控制的问题，通过WHO指南对三批生产样品进行理化参数、重金属（As、Cd、Hg、Pb）、微生物负荷和黄曲霉毒素检测，结合HPTLC、GC-MS和FT-IR技术分析乙醇提取物中的生物活性成分。结果表明该制剂符合安全标准，并首次揭示其富含酚类、黄酮类等功能化合物，为乌纳尼药物的现代化与国际化提供了科学依据。

　　

在传统医学日益受到全球关注的今天，乌纳尼（Unani）医学作为起源于古希腊的医学体系，在印度等地区拥有悠久的历史和广泛的应用。其中，I?rīfal ?aghīr（小伊特利法）是一种常用的多草药复方制剂，传统上用于治疗记忆障碍、神经衰弱、神经质和痔疮等疾病。然而，与许多传统草药制剂一样，I?rīfal ?aghīr面临着缺乏标准化质量控制体系的挑战。这导致不同批次产品之间可能存在差异，影响了其安全性、有效性和可接受度。随着人们对草药 medicine 的需求不断增加，建立科学的质量控制标准变得尤为重要。

为了应对这一挑战，研究人员在《Results in Chemistry》上发表了一项研究，旨在对I?rīfal ?aghīr进行全面的标准化和植物化学指纹图谱分析。该研究遵循世界卫生组织（WHO）指南，对三批独立生产的I?rīfal ?aghīr样品进行了系统评估，以确保其批间一致性和重现性。研究涵盖了从原料到成品的整个生产过程，重点考察了理化参数、重金属污染（砷、镉、汞、铅）、微生物负荷和黄曲霉毒素含量，以保障制剂的安全性和质量。此外，通过植物化学分析、高效薄层色谱（HPTLC）、气相色谱-质谱联用（GC-MS）和傅里叶变换红外光谱（FT-IR）等技术，定性分析了制剂中的生物活性成分，为揭示其药效物质基础提供了科学依据。

在技术方法上，研究人员主要采用了以下关键手段：首先，按照乌纳尼药典制备了三个批次的I?rīfal ?aghīr制剂，并依次使用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水进行索氏提取，以评估不同极性溶剂的提取效率。其次，通过初步植物化学筛查检测了多种次级代谢产物，如生物碱、酚类、黄酮类等。第三，利用粉末显微镜学对制剂中的三种主要植物原料（āmla、Halela、Balela）进行了鉴定。第四，按照药典方法测定了制剂的器官感觉特性、干燥失重、总灰分、酸不溶性灰分、连续提取值、脂肪含量、总固体、糖含量和pH值等理化参数。第五，采用原子吸收光谱法（AAS）分析了重金属含量，通过微生物培养法评估了微生物负荷，并使用免疫亲和柱-荧光计法（AflaTest）检测了黄曲霉毒素。最后，运用HPTLC进行指纹图谱分析，GC-MS用于鉴定乙醇提取物中的化学成分，FT-IR则用于识别功能基团。所有实验均遵循标准操作规程，并进行了方法学验证。

3.1. 溶剂效应

研究人员比较了不同极性溶剂（石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水）对I?rīfal ?aghīr的提取效率。结果表明，乙醇提取物的得率最高（35.2%），其次为水（28.9%），而非极性溶剂如石油醚的得率较低（2%）。这提示极性溶剂能更有效地提取制剂中的极性成分，因此选择乙醇提取物进行后续分析。

3.2. 初步植物化学分析

对五种溶剂提取物进行植物化学筛查发现，乙醇提取物中富含酚类、黄酮类、单宁、醌类、香豆素和糖类等生物活性成分，而生物碱、萜类、甾醇等在其他提取物中未检出。这些成分与神经保护等药理活性相关，支持了制剂的传统用途。

3.3. 生药学

通过粉末显微镜学观察，鉴定了制剂中三种主要植物原料（āmla、Halela、Balela）的显微特征，如表皮细胞、气孔类型和晶体结构，确保了原料的真实性。

3.4. 理化参数

I?rīfal ?aghīr呈半固体状，暗棕色，具酸味和苦甜味。理化分析显示，其干燥失重为10.78%，总灰分1.12%，酸不溶性灰分0.63%，pH值为3.7。这些参数符合草药制剂的质量要求，低水分含量有助于抑制微生物生长。

3.5. 重金属分析

重金属检测结果显示，砷、镉、汞、铅的含量均低于检测限，符合WHO和印度药典（API）的限量标准，表明制剂无重金属污染风险。

3.6. 微生物负荷

微生物检验表明，制剂中细菌和真菌总数均低于1 CFU/g，且未检出大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌，符合WHO安全标准，适合内服。

3.7. 黄曲霉毒素

黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的总量低于检测限（1 ppb），进一步证实了制剂的安全性。

3.8. HPTLC图谱

乙醇提取物的HPTLC分析在254 nm、366 nm和可见光下显示出多个特征斑点，R_f值具有批间一致性，定性揭示了生物活性化合物的存在。

3.9. GC-MS图谱

GC-MS鉴定出乙醇提取物中的18种主要成分，包括呋喃类（如2-呋喃甲醇，占46.73%）、脂肪酸（如十六烷酸）、糖类衍生物等。这些化合物具有抗菌、抗氧化、抗炎等报道活性，可能与制剂的疗效相关。

3.10. FT-IR分析

FT-IR光谱显示了羟基（-OH）、羰基（C=O）、胺基（C-N）等特征吸收峰，表明提取物中含醇、酚、酸、胺等功能基团，这些基团常与抗氧化活性有关。

综上所述，本研究首次对乌纳尼复方制剂I?rīfal ?aghīr进行了系统的标准化和植物化学指纹图谱研究。结果表明，该制剂在理化特性、重金属安全性、微生物质量和黄曲霉毒素控制方面均符合国际标准。通过HPTLC、GC-MS和FT-IR技术，研究揭示了其富含多种生物活性成分，如酚类、黄酮类和脂肪酸，这些成分可能共同贡献于其神经保护和抗氧化等传统功效。该研究不仅为I?rīfal ?aghīr的质量控制提供了科学依据，也为传统乌纳尼药物的现代化和国际化奠定了重要基础。未来研究可进一步聚焦于特定活性成分的分离鉴定及其药理机制探索，以充分发挥这一传统制剂的临床潜力。