猫传染性腹膜炎病毒与猫肠道冠状病毒差异性诱导PD-L1表达的机制及其在免疫逃逸中的作用

《Virology》：Differential induction of PD-L1 expression in cells infected with Feline Infectious Peritonitis Virus and Feline Enteric Coronavirus

本文揭示了猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）通过激活IFN-β信号通路上调PD-L1表达，进而抑制T细胞活化的新机制。与猫肠道冠状病毒（FECV）相比，FIPV特异性诱导免疫检查点分子表达，这为解释FIP的致病机制提供了新视角，并为PD-1/PD-L1轴靶向治疗提供了理论依据。

　　

章节亮点

细胞和病毒

CRFK细胞和Fcwf-4细胞购自美国模式培养物集存库（ATCC；马纳萨斯，弗吉尼亚州）。细胞在补充了10%胎牛血清（FBS）的Eagle极限必需培养基（MEM）中培养。人胚胎肾293T（HEK-293T）细胞购自ATCC（马纳萨斯，弗吉尼亚州），并在补充了10% FBS的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）中培养。人单核细胞THP-1细胞系购自ATCC，并在补充了10% FBS的RPMI培养基中培养。

FIPV-1146和FECV-1683在Fcwf-4和CRFK细胞中的生长动力学

在感染后24小时（hpi）内比较FIPV-1146和FECV-1683在Fcwf-4细胞和CRFK细胞中的生长动力学时发现，FECV-1683在两种细胞中的初始复制速度比FIPV-1146慢，但在24 hpi时达到了可比水平（图1A）。使用FCoV特异性抗体进行的荧光抗体（FA）染色（图1B）和蛋白质印迹（图1C）也证明两种病毒在24 hpi时在CRFK细胞中的复制水平相当。

FIPV-1146在Fcwf-4和CRFK细胞中上调PD-L1和PD-L2的表达

由FIPV-1146或FECV-1683诱导的PD-L1表达

讨论

FIPV-1146和FECV-1683均为血清型II FCoV，是分别代表FIPV和FECV的成熟原型毒株。尽管它们在S蛋白、ORF 3c辅助蛋白和7b辅助蛋白中分别具有95.3%、95%和82.5%的高总体RNA序列同源性，但它们在猫中引起不同的疾病（补充图1、2和3）。用FECV-1683接种无特定病原体（SPF）幼猫仅引起不显性感染或轻度肠炎，且不会导致FIP 9, 61。另一方面，FIPV-1146的接种则会导致致命的FIP。

结论

本研究首次证明了FIPV和FECV生物型在体外感染过程中PD-L1和PD-L2表达的差异性。FIPV引起的PD-L1水平升高可能导致T细胞反应减弱，使得巨噬细胞中的持续性感染成为可能，并最终导致FIP临床疾病的发生。除了目前可用的抗病毒药物外，PD-1/PD-L1轴可能成为FIP的一种有价值的治疗选择。