利用大蒜（Allium Sativum）提取物中的过氧化物酶活性进行抗坏血酸的比色测定

《Current Analytical Chemistry》：Colorimetric Determination of Ascorbic Acid Using Peroxidase Activity of Allium Sativum (Garlic) Extract

检测和确定商业样品中的抗坏血酸（维生素C）具有重要意义。本研究首次利用大蒜提取液作为生物催化剂，通过过氧化氢氧化TMB生成蓝色氧化TMB产物，吸光度变化与抗坏血酸浓度呈线性关系（9.46-155.24 μM），检测限低至0.0223 μM，在橙汁和维生素C片剂中的回收率高达97.70%-110.17%。优化了pH、反应时间、TMB和提取液浓度等关键参数。该研究开发了成本低、灵敏度高且操作简便的植物基比色传感器检测方法。

　　

摘要

背景：检测和测定商业样品中的抗坏血酸（AA）或维生素C作为一种强效抗氧化剂具有日益重要的意义。在抗坏血酸的比色法研究中，多次报道使用有机金属络合物作为过氧化物酶的模拟物，但这并不具备商业化的成本效益。因此，本研究首次尝试使用大蒜提取物来检测过氧化物酶的行为，而无需额外的提取和纯化步骤。

方法：在本研究中，首先通过将大蒜捣碎、搅拌并在水中超声处理来制备大蒜提取物（AS）。该提取物表现出过氧化物酶活性，能够在H2O2的存在下氧化3,30,5-和50-四甲基联苯胺（TMB），生成蓝色的氧化TMB（ox-TMB），其在6526 nm处具有明显的吸收峰。随后，向TMB+H2O2体系中加入抗坏血酸（AA）可以还原ox-TMB，从而导致吸光度下降和蓝色褪去。在优化了pH值、时间、TMB浓度和AS浓度等多个因素后，完成了检测方法的建立。

结果：结果显示，在9.46–155.24 μM的浓度范围内，加入抗坏血酸后吸光度的下降（ΔA）与抗坏血酸浓度呈良好的线性关系，检测限为0.0223 μM。该方法在商业橙汁和维生素C泡腾片中也得到了验证，回收率在97.70%–110.17%之间。

结论：最终开发出了一种灵敏且简单的比色传感器，利用大蒜提取物作为生物催化剂来检测抗坏血酸。