Ki-67标记指数与甲状腺乳头状癌侵袭性特征的关联性研究：一项回顾性分析

《Thyroid Research》：High Ki-67 labeling index correlates with aggressive clinicopathological features in papillary thyroid carcinoma: a retrospective study

本研究针对甲状腺乳头状癌（PTC）生物学行为异质性大、传统风险分层指标存在局限性的临床问题，通过回顾性分析92例PTC病例，系统探讨了Ki-67标记指数（LI）与临床病理特征及BRAFV600E突变状态的相关性。结果显示Ki-67 LI中位值为2.45%，其高表达（>5%）与高龄、晚期分期、淋巴结转移、远处转移、侵袭性亚型、淋巴血管侵犯（LVI）及BRAFV600E突变显著相关，证实Ki-67 LI可作为PTC侵袭性生物学行为的有效预测指标，为甲状腺癌精准预后评估提供了新的实验室依据。

　　

甲状腺作为人体重要的内分泌器官，其恶性肿瘤中的甲状腺乳头状癌（Papillary Thyroid Carcinoma, PTC）占所有甲状腺癌的80%-90%。尽管大多数PTC患者预后良好，仍有约2%-5%的病例表现为侵袭性强、易复发和耐药的特征。目前临床主要依据美国甲状腺协会（ATA）指南，结合患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、甲状腺外侵犯（Extrathyroidal Extension, ETE）、淋巴血管侵犯（Lymphovascular Invasion, LVI）以及BRAF^V600E等基因突变状态进行风险分层。然而，这些指标在预测个别患者预后时仍存在一定局限性，部分具有侵袭性特征的PTC患者可能被低估风险，导致治疗不足或过度。因此，探索新的、可靠的生物标志物以更准确识别高风险PTC患者，成为当前临床研究的重点之一。

在此背景下，细胞增殖标志物Ki-67逐渐受到关注。Ki-67是一种核抗原蛋白，其在细胞周期G1、S、G2和M期表达，而在静止期（G0期）不表达，因此被视为评估肿瘤细胞增殖活性的可靠指标。在乳腺癌、前列腺癌、胰腺神经内分泌肿瘤等多种恶性肿瘤中，Ki-67标记指数（Labeling Index, LI）已被常规用于诊断和预后评估。然而，其在甲状腺癌中的作用尚存争议，既往研究结果不一，且缺乏大样本数据的支持。为此，印度尼西亚大学附属Cipto Mangunkusumo医院的Defi Nurlia Erdian等研究人员开展了一项单中心回顾性研究，旨在系统分析Ki-67 LI与PTC多种临床病理参数之间的关系，并探讨其与BRAF^V600E突变的相关性，以验证Ki-67在PTC预后判断中的潜在价值。该研究近期发表于《Thyroid Research》期刊。

研究人员为完成这一研究，主要采用了以下几种关键技术方法：首先，收集2019年1月至2022年12月在该院病理科经手术切除并确诊的92例PTC患者的临床资料和病理标本；其次，由两位认证病理医师独立复核H&E染色切片，评估组织学亚型、肿瘤包膜、多灶性、LVI、ETE及淋巴结转移等指标；同时，采用聚合酶链反应（PCR）及Sanger测序技术检测BRAF^V600E突变状态；最后，利用免疫组织化学方法检测Ki-67蛋白表达，通过热点区域法在2000个肿瘤细胞中手动计算Ki-67 LI，并以5%作为临界值将患者分为低表达组和高表达组。所有统计分析使用SPSS软件完成，连续变量采用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis检验，分类变量采用卡方检验或Fisher精确检验。

研究结果部分通过连续分析和分类分析两种方式呈现了Ki-67 LI与各临床病理参数的关系。

在连续分析中，Ki-67 LI的分布范围为0.1%–17.1%，中位值为2.45%，四分位距（IQR）为2.83。研究显示，无包膜肿瘤（中位数2.75%）、临床分期III–IV期（中位数5.6%）、侵袭性组织学亚型（中位数3.47%）、 tall cell亚型（中位数4%）、存在淋巴结转移（中位数2.85%）、远处转移（中位数4.45%）、LVI（中位数3.45%）、ETE（中位数3.4%）以及BRAF^V600E突变（中位数2.92%）的病例中，Ki-67 LI的中位数均显著高于对应组别。

在分类分析中，以5%为界将Ki-67 LI分为低表达组（≤5%）和高表达组（>5%）。92例患者中有75例（81.5%）属于低表达组。统计分析表明，Ki-67 LI >5%与高龄（≥55岁）、晚期临床分期、侵袭性组织学亚型、淋巴结转移、远处器官转移、LVI、ETE以及BRAF^V600E突变均呈显著正相关，其比值比（OR）分别为4.5、7.6、11.8、4.8、4.0、13.3、6.2和4.1。而在性别、肿瘤大小、多灶性等方面，Ki-67 LI的表达未见显著差异。

讨论部分对上述结果进行了深入阐释。研究表明，Ki-67 LI的高表达与PTC的多个侵袭性特征密切相关，这与先前部分研究结果一致。例如，高龄患者Ki-67 LI较高，印证了年龄是PTC复发的重要风险因素；晚期肿瘤（III–IV期）和已有淋巴结或远处转移的病例中Ki-67 LI显著升高，提示高增殖活性与肿瘤进展和转移潜力相关。组织学方面，侵袭性亚型（尤其是 tall cell亚型）表现出更高的Ki-67 LI，反映出这些亚型固有的较强增殖能力和不良预后倾向。此外，无包膜肿瘤、存在LVI和ETE的病例中Ki-67 LI也较高，说明肿瘤的局部侵袭行为与细胞增殖活跃度相互关联。尤其值得注意的是，BRAF^V600E突变阳性的肿瘤中Ki-67 LI显著高于野生型，这为BRAF突变驱动PTC进展的分子机制提供了增殖角度的证据，也提示Ki-67 LI或许可作为BRAF突变肿瘤侵袭性的替代标志物。

本研究也存在若干局限性。回顾性设计和小样本量可能影响结果的普适性；部分统计结果的置信区间较宽，需谨慎解读。研究未对疾病结局（如复发率、无病生存期）进行追踪，因此Ki-67 LI与长期预后的直接关联尚未验证。此外，Ki-67免疫组化评估存在主观性，且肿瘤内异质性可能影响热点区域LI值的准确性和可重复性。未来需要更大规模、前瞻性的研究，结合标准化Ki-67评估流程和临床结局数据，进一步验证其在PTC预后分层中的实际效用。

综上所述，该项研究通过系统分析证实，Ki-67所代表的肿瘤细胞增殖活性与PTC的多种侵袭性临床病理特征（包括高龄、晚期分期、淋巴结与远处转移、侵袭性亚型、无包膜、LVI、ETE及BRAF^V600E突变）显著相关。这些发现支持将Ki-67 LI视为PTC预后评估的一个潜在指标，尤其在分子检测不可及的情况下，或可作为传统风险分层系统的有益补充，有助于识别高风险患者，指导个体化治疗决策。该研究为全球范围内理解Ki-67在PTC中的作用增添了新的证据，也为后续探索其临床转化价值奠定了基础。