靶向PLA2R的嵌合自身抗体受体T细胞治疗膜性肾病临床前研究

《Kidney International Supplements》：Preclinical evaluation of antigen-specific B-cell depletion for phospholipase A2 receptor membranous nephropathy with chimeric autoantibody receptor T-cells.

本文报道了靶向磷脂酶A2受体（PLA2R）的嵌合自身抗体受体T细胞（CAART）在膜性肾病（MN）治疗中的突破性进展。研究通过构建C17/C178-CAART特异性清除自身反应性B细胞，证实其可高效吸附69-97%的抗PLA2R抗体（in vitro），并在异种移植模型（Nalm-6）中显著抑制靶细胞生长（in vivo），为精准免疫治疗提供新策略。

　　

Abstract

Introduction

磷脂酶A2受体（PLA2R）相关膜性肾病（MN）是成人肾病综合征的主要病因，由靶向肾足细胞PLA2R的自身抗体驱动。利妥昔单抗的广谱B细胞耗竭疗法存在严重感染风险，且对高蛋白尿患者疗效有限。本研究探索了开发靶向PLA2R的嵌合自身抗体受体T细胞（CAART）用于特异性B细胞耗竭的可行性。

Methods

通过T细胞慢病毒转导制备PLA2R-CAART。针对靶向PLA2R免疫显性表位的B细胞系及原代PLA2R MN B细胞进行体外细胞毒性及特异性评估。通过PLA2R MN IgG吸附实验评估候选CAART设计对致病性自身抗体的靶向能力。在异种移植抗PLA2R Nalm-6临床前小鼠模型中评估特异性细胞毒性、植入能力及脱靶毒性，并利用人类膜蛋白组芯片进行毒理学筛查。

Results

我们成功构建了靶向PLA2R关键表位（CysR、CTLD1、CTLD7±CTLD8）的CAART。C17-和C178-CAART在原代T细胞中高效表达，并对靶向CysR/CTLD1/CTLD7表位的抗PLA2R B细胞系展现特异性细胞毒性。与原代B细胞或MN患者血浆共培养时，两种CAART均显著减少抗PLA2R B细胞，并吸附69-97%的血浆抗体活性。在Nalm-6异种移植模型中，C17-CAART表现出持续增强的细胞毒性，显著抑制靶细胞生长。通过病理学分析和膜蛋白组芯片验证，未发现明显脱靶结合。

Conclusions

本研究为PLA2R-CAART的抗原特异性B细胞耗竭治疗潜力提供了临床前概念验证，后续需进一步探索其临床转化可行性。

Introduction

磷脂酶A2受体相关膜性肾病（PLA2R MN）是成人肾病综合征常见病因，以肾小球上皮下免疫复合物沉积为特征。约70-80%特发性MN患者体内存在靶向PLA2R的自身抗体（以IgG4亚型为主）¹。足细胞上抗PLA2R免疫复合物引发补体介导的损伤，导致上皮下沉积、足细胞足突消失及肾病水平蛋白尿^2,3,4。

当前PLA2R MN治疗方案依赖糖皮质激素、钙调神经磷酸酶抑制剂、环磷酰胺或抗CD20单抗（如利妥昔单抗）等广谱免疫抑制剂。尽管利妥昔单抗可降低PLA2R抗体滴度并诱导缓解，但其非特异性B细胞耗竭可能导致感染风险，且在肾病水平蛋白尿患者中半衰期缩短，易引发治疗抵抗或复发^5,6。

嵌合抗原受体T细胞（CART）疗法通过工程化改造患者T细胞实现B细胞的高效耗竭，已革新B细胞肿瘤治疗格局。近年发展的嵌合自身抗体受体（CAAR）技术可选择性清除自身反应性B细胞，已在抗桥粒芯蛋白3天疱疮、重症肌无力、抗NMDAR脑炎等自身免疫病模型中展现潜力^7-14。PLA2R抗原结构复杂，此前研究仅初步验证了靶向CysR域的CAAR设计⁹。本研究系统性评估了PLA2R特异性CAART的体内外药效与毒性。