希俄斯乳香胶体内遗传毒性评估：大鼠骨髓微核试验揭示其安全性

《Toxicology Reports》：In vivo genotoxicity of Chios mastic gum in rodent bone marrow micronucleus test

本研究针对希俄斯乳香胶(CMG)遗传毒性数据缺失的问题，通过大鼠体内微核试验评估其安全性。研究人员采用2000 mg/kg极限剂量灌胃给药3天，通过骨髓涂片分析和UHPLC-HRMS/MS技术验证，发现CMG不诱发微核形成且无细胞毒性，为CMG的药用安全性提供了关键实验证据。

　　

在希腊希俄斯岛特有的乳香黄连木（Pistacia lentiscus L.）树脂——希俄斯乳香胶（Chios Mastic Gum, CMG），自古以来就被用于治疗消化不良、皮肤炎症和伤口愈合。近年来，欧洲药品管理局（EMA）已承认其作为传统草药的地位。大量研究证实CMG具有抗菌、抗炎、降血脂、降血糖、抗动脉粥样硬化及改善胃肠道疾病等多种药理活性。随着CMG在营养保健品和药物市场的应用日益广泛，其安全性评价显得尤为重要。尽管CMG的传统使用历史较长，但关于其遗传毒性的系统研究却十分有限，特别是缺乏符合国际规范的体内遗传毒性试验数据。

为解决CMG安全性数据缺失的问题，研究团队开展了首次针对CMG的体内哺乳动物红细胞微核试验。该研究采用OECD 474指南推荐的极限试验法，以2000 mg/kg体重的剂量对雄性Wistar大鼠连续灌胃3天，通过骨髓涂片分析评估CMG对染色体损伤的潜在影响。令人鼓舞的是，实验结果显示CMG处理组的大鼠未出现死亡、中毒临床症状或体重变化，骨髓中多染性红细胞（PCE）与正染性红细胞（NCE）的比例与阴性对照组无显著差异，微核化多染性红细胞（MNPCE）的发生率也未增加。更重要的是，通过超高效液相色谱-高分辨质谱联用（UHPLC-HRMS/MS）技术，研究人员在CMG处理组大鼠的骨髓和血浆中明确检测到了莫诺酸（moronic acid）、齐墩果酸（oleanonic acid）和异乳香二烯酮酸（isomasticadienonic acid）等特征性三萜酸，这为CMG成分能够到达靶组织提供了直接证据。

研究团队采用了几项关键技术方法：基于OECD 474指南的哺乳动物红细胞微核试验，使用雄性Wistar大鼠（来源：Benaki植物病理研究所繁殖群体）进行极限剂量测试；通过Giemsa和May Grunwald染色进行骨髓涂片分析；利用UHPLC-HRMS/MS技术检测血浆和骨髓中的三萜酸成分；采用适当的统计方法（Shapiro-Wilk正态性检验，ANOVA或Kruskal-Wallis检验）进行数据分析。

3.1. 动物存活期和尸检结果

所有接受CMG处理的大鼠均存活至实验结束，未观察到中毒临床症状。尸检结果未发现明显器官病理学改变。CMG处理组与对照组在实验开始和结束时的体重均无显著差异，表明CMG处理对大鼠生长无不良影响。

3.2. 骨髓评分结果

显微镜分析显示，CMG处理组的多染性红细胞百分比（%PCE）和PCE/NCE比值与阴性对照组相比无显著差异，表明CMG对骨髓红细胞生成无细胞毒性。微核化多染性红细胞的发生率在CMG处理组与阴性对照组间也无显著差异，而阳性对照环磷酰胺组则显著增加了微核发生率，证实了实验系统的敏感性。

3.3. 血浆和骨髓提取物中乳香成分的UHPLC-HRMS/MS分析

通过UHPLC-HRMS/MS分析，在CMG处理组大鼠的血浆和骨髓样本中明确检测到了CMG的特征性三萜酸成分（莫诺酸、齐墩果酸和异乳香二烯酮酸/乳香二烯酮酸），而在未处理组中未检测到这些成分，证实了CMG成分的生物利用度和骨髓暴露。

本研究首次通过规范的体内微核试验评估CMG的遗传毒性，结果表明在2000 mg/kg体重的极限剂量下，CMG未诱发染色体损伤，且无明显的骨髓细胞毒性。这一发现为CMG的安全性提供了重要科学依据，支持其在药物和营养保健品领域的进一步开发应用。研究还通过先进的质谱技术证实了CMG活性成分能够到达靶组织，为后续药代动力学研究奠定了基础。该成果发表于《Toxicology Reports》，对推动传统草药的现代化评价和国际化应用具有重要意义。