乳腺癌治疗进程中MALAT1 lncRNA的动态表达图谱与转移潜能关联研究

《Molecular Therapy Oncology》：Longitudinal tracking of MALAT1 level over a breast cancer patient’s course of treatment and disease progression

本刊推荐：为阐明长链非编码RNA在乳腺癌临床进展中的动态变化规律，研究团队采用单分子RNA荧光原位杂交技术，首次对一名三阴性乳腺癌患者2.5年治疗周期内连续5次活检组织进行MALAT1纵向追踪。发现MALAT1在肿瘤细胞中持续高表达于相邻基质，治疗后复发灶中表达降低，而对侧远端转移灶中显著升高，提示其可作为治疗反应评估和转移风险分层的潜在生物标志物。

　　

在女性恶性肿瘤领域，乳腺癌始终保持着高发病率的严峻态势，尤其当癌细胞发生远端转移后，患者生存率将急剧下降。尽管早期诊断和靶向治疗手段不断进步，但肿瘤复发和转移仍是临床面临的主要挑战。近年来，科学家们将目光投向长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）这一调控基因表达的关键分子家族，其中转移相关肺腺癌转录本1（Metastasis-Associated Lung Adenocarcinoma Transcript 1, MALAT1）作为明星分子，在20多种肿瘤中异常高表达，与肿瘤增殖、转移和治疗耐药密切相关。然而，在真实的临床治疗场景中，MALAT1的表达模式如何随着疗程推进和疾病演变而动态变化，至今仍是未解之谜。

为解开这一谜题，研究团队在《Molecular Therapy: Oncology》发表了开创性案例研究，首次对一名59岁三阴性乳腺癌（Triple-Negative Breast Cancer, TNBC）患者长达2.5年的治疗周期内获取的5次活检组织进行纵向追踪。该患者经历从初诊原发性肿瘤到局部复发，最终发展为对侧胸壁转移的完整病程，为研究提供了珍贵的连续样本。

研究采用单分子RNA荧光原位杂交（single-molecule RNA fluorescence in situ hybridization, smRNA-FISH）这一高分辨率技术，通过杂交链式反应（Hybridization Chain Reaction, HCR）v3.0信号放大系统，结合Zeiss LSM980 Airyscan2激光共聚焦显微镜成像和Imaris软件定量分析，实现对FFPE组织切片中MALAT1表达的精准空间定位和单细胞水平定量。技术关键还包括利用相邻连续切片进行H&E染色明确肿瘤区域与基质边界，DAPI核染色界定细胞核区域。

肿瘤/转移病灶MALAT1表达显著高于相邻基质

通过smRNA-FISH技术可视化分析，研究发现所有活检样本中肿瘤细胞核内MALAT1信号强度均显著高于相邻基质细胞。核内定位模式与既往研究一致，主要富集于核斑结构。对侧乳腺转移活检样本的对比显示，转移区域（M）的MALAT1表达强度远超周围正常基质（S），证实了MALAT1在恶性肿瘤细胞中的特异性高表达特征。

smRNA-FISH揭示治疗进程中MALAT1水平的纵向调控

纵向分析显示MALAT1表达呈现动态波动：初治肿瘤（活检#1）呈现高表达水平；经过肿瘤切除、放疗和化疗后，复发的TNBC肿瘤（活检#2）和ER阳性肿瘤（活检#3）中MALAT1表达明显降低；双侧乳房切除联合化疗/免疫治疗后，右侧胸壁局部皮肤转移灶（活检#4）仍保持较低表达水平；而最具突破性的发现出现在对侧左胸壁远端转移灶（活检#5），其MALAT1表达呈现爆发式增长，显著超过初治原发肿瘤的表达水平。

定量分析约1,200个细胞核的数据证实，肿瘤/转移区域（T/M）与基质区域（S）的MALAT1表达差异具有统计学显著性（p < 0.0001）。特别值得注意的是，对侧转移灶的MALAT1表达中位数显著高于初治肿瘤（p = 1.09 × 10^-18）。进一步分析发现，高表达样本中每个细胞核内的MALAT1核斑数量也相应增加，表明表达量的提升直接转化为核斑结构的增多。

研究结论强调，MALAT1表达水平与乳腺癌疾病进展存在动态关联：初治高危原发性肿瘤（ER阴性、PR弱阳性、Her2阴性）经历化疗后复发时，两个复发灶（TNBC和ER阳性）均显示MALAT1表达降低；进一步化疗/免疫治疗后出现的局部转移灶保持较低水平；而最终发展的远端转移灶却呈现MALAT1表达的急剧升高。这一模式支持MALAT1在转移再激活过程中的关键作用，与其调控肿瘤细胞休眠和免疫逃逸的功能相符。研究还展示了smRNA-FISH技术在解析生物标志物空间表达模式方面的独特优势，为临床预后评估提供了新思路。这些发现不仅强化了MALAT1作为治疗靶点的潜力，也提示针对MALAT1的反义寡核苷酸（ASO）疗法与现有治疗方案联用，可能有效抑制转移性疾病的进展。