基于高通量PCR试纸条法的四种胎盘药材快速鉴别新策略
《Analytical Biochemistry》:A high-throughout PCR test strip method for the rapid identification of four placentas
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时间:2025年11月02日
来源:Analytical Biochemistry 2.5
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本文建立了一种高通量PCR免疫胶体金试纸条法,可同步快速鉴别鹿胎盘、人胎盘、猪胎盘与牛胎盘。该方法通过优化基因组DNA提取、设计物种特异性引物(mitochondrial cytochrome b基因),结合免疫胶体金试纸条实现扩增产物的可视化检测,具备强特异性、高灵敏度(0.01 ng·μL?1)和稳定性,为中药材市场现场快速监控提供了技术支撑。
本研究成功开发了一种高通量快速检测方法,可同步鉴定鹿胎盘、人胎盘、猪胎盘和牛胎盘。通过优化基因组DNA提取流程、设计物种特异性引物,并结合免疫胶体金试纸条进行可视化检测,该方法展现出卓越的特异性、良好的重复性与稳定性,其灵敏度(0.01 ng·μL?1)显著优于传统凝胶电泳技术。这一创新方案为中药材市场的现场快速监测与质量控制提供了高效技术手段。
目前物种鉴定的分子技术包括实时荧光定量PCR (qPCR)、DNA条形码测序以及常规PCR结合凝胶电泳等。相较于依赖昂贵仪器的qPCR、耗时长且需专业实验室的DNA条形码技术,或操作繁琐且存在安全隐患的常规PCR-凝胶电泳法,本研究建立的免疫胶体金试纸条检测法具备快速、直观、低成本的优势,尤其适用于现场快速筛查。
本研究成功构建了一种可同步鉴别四种胎盘药材的高通量快速检测体系。通过优化DNA提取与PCR条件,并利用免疫胶体金试纸条实现可视化判读,该方法在特异性、重现性、稳定性及灵敏度方面均表现优异,为中药材市场监管提供了可靠的技术支持。
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